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20世纪70年代以来,抗生素的广泛大量应用及滥用所导致的细菌耐药性已成为威胁人类健康的焦点问题,抗生素和耐药菌对水环境所造成的污染及由此产生的环境效应在近些年来也开始被关注。β-内酰胺类抗生素是目前使用最广泛的一类抗生素,因此也导致了环境中分布着各种β-内酰胺类抗性菌株。本文通过研究上海市不同地区不同水环境包括了闵行水质净化厂进水、活性污泥和出水、松江五厍农业园养殖业排放水及河流水中产β-内酰胺酶乳糖发酵型肠杆菌的表型和基因型的特征,以及三种水环境中数量上的比较,初步探讨分析了抗生素及耐药菌对不同水环境造成的影响、耐药菌的来源及产生抗性的原因。闵行水质净化厂的水源主要是居民生活污水和医院排水等,污水经过处理后细菌总数和乳糖发酵型肠杆菌总数相对于进水水样,最终出水中都有明显的降低,降低了约4-5个数量级,且总体比较稳定。松江五厍农业园内的养殖排放水中细菌总数和LFE总数相当于水质净化厂进水的菌株数量,但是淡水河的菌株数检测结果明显低于两者。其中养殖废水在9月份时LFE数量最高,这可能与9月份养虾塘和养蟹塘换水频率和排污强度的增加有关。闵行水质净化厂进水水样中,当麦康凯培养基中阿莫西林浓度由25μg/mL增加为50μg/mL时,LFE出菌数递减率为17-31%；当麦康凯培养基中头孢克肟浓度由25μg/mL增加为50μg/mL时,LFE出菌数降低了11-23%；当麦康凯培养基中头孢克洛浓度由25μg/mL增加为50μg/mL时,LFE出菌数递减了15-30%。当培养基中阿莫西林、头孢克肟和头孢克洛浓度为100μg/mL, LFE出菌数降低了50%以上。松江五厍农业园养殖排水中,当麦康凯培养基中3种抗生素浓度由25μg/mL增加为50μg/mL时,每个月份的LFE出菌数递减率平均为20%左右,要低于水质净化厂进水中LFE出菌数递减率。检测的几个月份的闵行水质净化厂污水中β-内酰胺类抗性菌株的耐药基因中,编码超广谱β-内酰胺酶的TEM基因最检出率高,分布在48-74.8%之间；松江农业园养殖水中抗性菌株的TEM基因检出率分布在41-51.8%之间；淡水河中TEM基因阳性率在44%-64%之间,可以看出TEM基因在不同水环境中检测率都是最高的,可见在长期的抗生素和致病菌的选择下,细菌产生耐药性的主导因素主要为编码超广谱β-内酰胺酶的TEM基因所致。本次实验对抗性菌株抽提质粒的PCR结果中可看出TEM、SHV、CTX-MU基因在抽提质粒上都能检测出,并且检测结果与菌落PCR法基本一致,这也验证了超广谱β-内酰胺酶多数是由质粒编码产生的。本研究将来自携带多重耐药基因菌株测序结果中选出携带三种耐药基因的大肠杆菌和志贺氏菌作为水平基因转移的供体菌,视为产ESBL的供体菌。受体菌来自闵行水质净化厂12月份进水中分离的阿莫西林抗性菌株中不具有耐药基因的乳糖发酵型肠杆菌,视为非产ESBL的受体菌。将供体菌和受体菌混合培养,结果培养出混合菌初探是否具有了耐药性,已验证是否发生基因水平方向的转移。