论文部分内容阅读
类病毒体作为一种新型的治疗载体得到了广泛的研究,但目前方法制备的类病毒体存在免疫原性,安全性,操作费时等缺点。为避免传统制备方法存在的问题,我们直接以表达病毒融合蛋白VSVG的细胞为原料进行类病毒体的制备。 首先我们通过构建VSVG重组腺病毒和构建可诱导型VSVG表达质粒获取瞬时和稳定表达VSVG的细胞,融合实验结果显示两种细胞均能在其细胞膜上表达成熟的VSVG。为保证制备细胞质膜微囊的完整性,我们使用化学诱导的方法制备PMVs,实验结果显示碘乙酸钠诱导剂相对于甲醛诱导剂对VSVG的功能无显著影响。且通过化学诱导获得的PMVs含有丰富的胞浆蛋白和VSVG。最后我们使用正辛酸溶解的方法将细胞质膜微囊转变为类病毒体。原子力显微镜检测结果显示,我们得到的类病毒体形态均一,与传统方法制备的类病毒体和病毒大小类似。荧光示踪试验结果显示,我们制备的类病毒体可以被细胞有效的摄取。这种简便,安全的类病毒体制备方式将会进一步促进基因治疗的发展。