生化分析中的毛细管电泳—安培检测联用技术研究

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毛细管电泳是近二十年来发展最为迅速的分离分析技术之一。它把传统的电泳技术和现代高效液相色谱技术的优点结合在一起,将分离柱效提高到上百万理论塔板数,进样量也从微升水平进入纳升水平,由于毛细管电泳具有多种分离模式,其研究和应用涉及到药物分析、生化分析、食品分析、坏境分析等几乎所有的分析化学领域。但毛细管电泳的较小的进样量和极细的毛细管内径也给其检测带来了很大的困难。紫外检测、激光诱导荧光检测、化学发光检测、质谱检测等各种检测方法都具有一定的优点,但往往存在仪器比较昂贵、衍生化步骤烦琐等缺点。电化学检测中的安培检测技术,具有高的灵敏度,且仪器设备简单、价格成本低、线性范围宽、操作简便、死体积小等特点,因而其与毛细管电泳联用后在分析化学领域得到了广泛的研究和应用。 同高效液相色谱分离相比,毛细管电泳在分离效率和仪器设备等方面有明显的优势。但由于毛细管电泳进样量远远小于液相色谱,利用紫外或荧光检测时光程很短,导致浓度检测灵敏度较低,不能满足有些痕量分析的要求。利用毛细管电泳本身的一些特殊性质,通过改变其进样和分离时的一些条件,如采用电堆集、场放大进样和等速电泳等简单易行的方法,可以显著提高毛细管电泳检测灵敏度。 本论文研究了毛细管电泳-安培检测联用技术在生化分析中的一些应用。同时也探讨毛细管等速电泳-安培检测联用技术中提高灵敏度的方法,包括场放大进样和等速电泳富集等。主要内容共分为四章: 第一章为绪论。在该章中综述了毛细管电泳的特点、分离模式和进样技术、样品富集技术、毛细管电泳-安培检测的联用技术的发展现状等,并简单介绍了本论文的研究目的和意义。共引用文献196篇。 第二章内容是血浆中水溶性小分子抗氧化剂的毛细管电泳-电化学检测研究。人体内的水溶性小分子抗氧化剂包括抗坏血酸(Vc)、谷胱甘肽(GSH)、尿酸(UA)、色氨酸(Try)和半胱氨酸(Cys)等。这些小分子抗氧化剂物质的分析主要以高效液相色谱-紫外/电化学检测联用为主,其中电化学检测比紫外检测有更高的灵敏度。本文应用毛细管电泳-电化学检测方法,以金属铜电极为枪测电极,探索了测定人血浆中水溶性小分子抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)、尿酸(UA)、色氨酸(Try)和半胱氨酸(Cys)的最佳
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