【摘 要】
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p21基因激活的程度在转录水平是由其启动子的活性决定的.p21基因启动子活性的增强将导致p21基因的高表达,从而抑制CDK的活性.p21基因启动子的上游调控序列受多种转录因子的调
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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p21基因激活的程度在转录水平是由其启动子的活性决定的.p21基因启动子活性的增强将导致p21基因的高表达,从而抑制CDK的活性.p21基因启动子的上游调控序列受多种转录因子的调控,它们能结合在不同的调控序列位点上,在转录水平对p21的表达产生影响.其中p53对p21的调控作用受到了广泛的关注,因为它是人体中一种重要的抑癌基因.循此思路我做了如下工作:一)构建了p21基因不同长度启动子驱动的pMREP4/CAT报告基因质粒;二)为了科学地检测p21基因启动子活性,从转染质粒总量、报告基因质粒与内参照质粒的比例及RNA模板的量3个方面优化了RT-PCR检测体系的条件.三)应用竞争性RT-PCR的方法,通过对比热休克组细胞(42℃,1小时)和对照组细胞(37℃,1小时)报告基因及内参照扩增条带亮度比例的差异来研究热休克对A549细胞中p21基因启动子活性的影响.四)应用同样的方法,我们研究了不同长度的p21基因启动子在热休克激活p21基因启动子中的作用.结果发现,p21基因上游-2291bp~-275bp这段调控序列在热休克激p21基因启动子中作用最显著,它是p21基因启动子受热休克调控的元件的位置.
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