拟南芥LecRK-8A基因调控种子大小分子机理研究

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类受体蛋白激酶(RLK)是植物感受并传递胞外信号至胞内的重要蛋白,在植物生长发育及生物和非生物胁迫应答方面具有不可代替的功能。其中的凝集素类受体激酶(Lec RK)家族在植物免疫、逆境胁迫应答和激素应答等方面扮演关键角色,其中个别成员参与花粉发育过程表明Lec RK家族成员在植物发育过程中也有潜在功能。Lec RK-8A作为该家族的成员,具有该家族典型的跨膜域和信号肽,预示着其定位在细胞膜上;e FP结果显示Lec RK-8A在种子发育第6-7阶段的种皮中高表达,说明Lec RK-8A在种子发育过程中有潜在功能。种子发育成熟是胚、胚乳和种皮发育的综合结果,任何组织发育异常均会影响种子的形态结构或营养成分变化,这些组织的发育受油菜素内酯(BR)、脱落酸(ABA)、细胞分裂素(CTK)、生长素(IAA)等植物激素的影响,并且也受泛素化过程及其他途径的调控。通过比较Lec RK-8A缺失突变体及过表达株系种子与野生型的差异,发现Lec RK-8A缺失突变体种子变小而过表达株系种子变大,显示Lec RK-8A在种子发育中扮演重要角色。利用微分相差显微镜观察不同发育时期的种子,结果显示Lec RK-8A在球形胚之前已开始影响种子发育;缺失突变体与野生型进行正反交获得种子的大小与母本相似,说明Lec RK-8A是在种皮中表达,并通过母本基因组表达调控种子发育过程。为了分析Lec RK-8A亚细胞定位及表达模式,构建了35S::Lec RK-8A-GFP瞬时表达载体及Pro Lec RK-8A::GUS载体。同时分析缺失突变体和野生型第6-7阶段果荚中与种子发育相关基因的表达,发现Lec RK-8A独立于IKU1和SHB1途径促进MINI3表达影响种子发育,同时抑制AP2的表达。Lec RK-8A基因表达受外源ABA抑制,促进高盐胁迫条件下种子萌发,并且促进ABI5的表达,可能通过ABI5-SHB1弥补Lec RK-8A功能缺失导致的种子变小。总之,Lec RK-8A与ABA信号通路相互影响共同调控种子发育。本论文研究的Lec RK-8A促进种子变大,对农作物产量提升具有重要的参考价值。
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