毛细管电泳中应用移动反应界面理论对猪饲料及尿样中克伦特罗和沙丁胺醇的快速检测及富集

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近年来,毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)因其具有高效、快速、样品和试剂用量少等诸多优点,成为发展最快的新型分离分析方法之一,已被广泛应用于生物、医药、化工、环境等领域。但是由于毛细管的内径小,上样量少,限制了其检测灵敏度。为了提高毛细管电泳的检测灵敏度、适应低浓度样品分离检测的需求,近年来多种毛细管电泳在线样品富集方法得以发展。通过设计实验方法,将毛细管中低浓度样品条带压缩,利用这些方法可以提高检测灵敏度,降低样品的浓度检测限,拓展CE在包括痕量分析的众多领域的应用。本课题基于移动反应界面(moving reaction boundary,MRB)这一在线富集理论,致力于研究该方法在食品添加剂中的应用。本论文首先介绍了毛细管电泳(CE)技术的基本原理,其次综述了其在线富集方法,特别是MRB理论的若干机理及应用,最后运用该理论对饲料添加剂中微量物质“瘦肉精”进行了快速检测和富集。实验课题分为两个部分。第一部分运用常规的毛细管区带电泳技术对猪饲料中的克伦特罗及沙丁胺醇进行了快速分离检测。实验创新的运用了碱性磷酸盐缓冲液,在最优化缓冲液pH值、缓冲液浓度、工作电压下,待测物质在4.5分钟之内获得了很好的分离检测,同时避免了猪饲料中大量杂质物质的干扰。第二部分实验中,我们运用移动反应界面理论(MRB),对猪尿样中的克伦特罗及沙丁胺醇进行了富集与检测。在实验中,我们引入了样品相与背景相,确定了该方法的最优化条件,包括背景缓冲液pH值及缓冲浓度、样品缓冲液pH值及缓冲浓度、上样方式、工作电压等。在最优化条件下,该方法分别对猪尿样中的克伦特罗及沙丁胺醇的达到了705倍和247倍的富集。
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