在自然环境中，含镉的化合物具有较高的脂溶性和生物富集性，毒性强、危害大。传统的物理化学方法并不能正确反映出镉化合物对生物体引发的生物毒性效应，而生物方法可以直接检测镉化合物对生物体的毒理作用，更能够体现镉化合物在环境中的实际污染程度。本文以全套细菌荧光素酶基因(luxCDABE)为报告基因，以含有特异性镉启动子PcadA的质粒(pPcadA-gfp)为载体，构建由Cd2+诱导的含报告基因luxCDABE的重组质粒(pPcadA-luxCDABE-gfp)，感受态转化法将其导入枯草杆菌B.subtilis受体菌，构建特异性检测 Cd2+的工程菌，并应用于环境中痕量重金属镉的检测。研究方法如下：　　 (1)鉴定实验所需的两个菌种：含有质粒pMD20-T-luxCDABE的大肠杆菌E.coli HB101和含有质粒 pPcadA-gfp的枯草杆菌B.subtilis 1A751。E.coli HB101采用蓝白斑筛选法鉴定。将B.subtilis 1A751菌悬液制成载玻片，在荧光显微镜下观察菌体特征，提取质粒 pPcadA-gfp，BamHI/HindIII和BamHI/EcoRI双酶切后，用琼脂糖凝胶电泳分析鉴定；　　 (2)构建重组质粒(pPcadA-luxCDABE-gfp)：利用基因工程技术，用BamHI单酶切获得目的基因luxCDABE及载体质粒pPcadA-gfp；在T4连接酶的作用下，将luxCDABE插入到PcadA的下游，构建重组质粒 pPcadA-luxCDABE-gfp。将重组质粒(pPcadA-luxCDABE-gfp)导入E.coli进行增殖，通过 Cm抗性平板筛选获得克隆并进行酶切鉴定。筛选的重组质粒导入耐受重金属镉的 B.subtilis，做部分研究。　　 实验结果：通过蓝白斑筛选E.coli HB101菌株，Amp抗性平板上生长白色菌落表示菌体中含有质粒pMD20-T-luxCDABE；B.subtilis 1A751菌悬液在蓝光激发下发出绿色荧光，说明菌体中含有质粒pPcadA-gfp，并能表达出GFP。从宿主菌中提取重组质粒 pPcadA-luxCDABE-gfp，经酶切初步鉴定，pPcadA-luxCDABE-gfp构建成功，为进一步研究Cd2+是否诱导luxCDABE的表达及获得监测Cd2+的工程菌株打下基础。