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背景与目的目前在全球范围内,消化道恶性肿瘤频繁发生且愈发严重,其中食管癌是一种较为严重的恶性肿瘤,具有很高的发病率与死亡率,在较大程度上危害人民生命健康。作为世界上食管癌高发地区,我国食管癌患病率居高不下且不断增长,大约10万人中便有10人发病,特别是在河北(太行山周边),以及河南的林州市、辉县、安阳等地区。食管癌的组织学类型主要以鳞状细胞癌和腺癌两种为主,在我国大部分食管癌患者中,鳞状细胞癌为主要的发病类型,而腺癌仅占一小部分。食管癌解剖部位较为特殊,因此食管癌的早期诊断极为困难,患者常常在症状发作甚至严重时才进行诊治,发病率约等同于死亡率。因此若能在早期病变时明确诊断并加以治疗,对筛选高危病人及提高患者生存率大有益处。食管癌有很多方面的发病原因,目前主要有遗传因素、环境因素等学说,但仍未阐释清晰。随着细胞与分子生物学的逐渐快速发展,人们逐步认识到肿瘤的发生与发展是一个多因素、多基因参与的复杂过程。关于食管癌临床形态学和病理特征的研究日益增多,但仍未筛选出具有临床实用价值的预测因子。近年来许多研究显示,除了受癌基因与抑癌基因调控细胞恶性转化外,细胞周期调控分子及其受体蛋白,即细胞周期蛋白依赖性激酶等,可激活体内细胞信号转导通路,并激发执行细胞周期有序进行中的重要功能,在细胞生长与增殖、分化中具有重要作用与意义。CDK14(PFTK1)是一个比较新且研究甚少的CDK家族成员,它是细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)的一种,研究者发现PFTK1/CyclinY可以在体内磷酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白(low-density lipoprotein receptor-related protein,LRP)5和6,而LRP5和LRP6均可与Wnt蛋白结合,结合后其作为胞外信号的辅助性受体,具有重要调节作用。目前已有报道CDK14可作为少有调控因子调控肝癌的发生发展。但其在食管鳞癌中的表达仍未见报道。Pang等发现了PFTK1的过表达与肿瘤晚期转移与微血管的侵袭均密切相关,血管内皮生长因子家族的血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)作为最重要的调控淋巴管生成信号传导通路的生长因子,它可诱导血管和淋巴管的生成,促进肿瘤细胞的淋巴结转移,但其在食管鳞癌淋巴结转移及预后中的作用尚不能确定,与PFTK1的关系研究尚未有报道。本实验采用原位杂交和免疫组织化学SP法分别检测PFTK1、LRP5、LRP6与VEGF-C蛋白和mRNA在食管鳞癌中的表达水平,阐明以上四种因子对于食管鳞癌发生、发展、浸润及转移的影响及其相互关系。材料与方法1.分别选取53例食管鳞癌组织、21例癌旁不典型增生组织、25例正常食管黏膜组织,采用免疫组化SP法测定3种组织中PFTK1、LRP5、LRP6和VEGF-C蛋白的表达。2.运用原位杂交技术检测53例食管鳞癌组织、21例癌旁不典型增生组织、25例正常食管粘膜组织中的PFTK1、LRP5、LRP6与VEGF-CmRNA表达。3.采用SPSS20.0进行统计分析。其阳性率比较采用χ2检验进行;对于数据不符合卡方检验分析条件时,运用Fisher确切概率法。结果:1.食管鳞癌组织中PFTK1mRNA及蛋白表达水平随着LRP5、LRP6、VEGF-C表达水平的升高而升高(P<0.05)。2.与正常食管黏膜组织和癌旁不典型增生组织相比,PFTK1mRNA和蛋白表达的阳性率在食管鳞癌组织中显著增高,其mRNA阳性率分别为4.0%(1/25)、38.1%(8/21)、83%(44/53),三者比较差异具有统计学意义(P<0.05),其蛋白表达的阳性率分别为8.0%(2/25)、38.1%(8/21)、71.7%(38/53),三者比较差异具有统计学意义(P<0.05);PFTK1mRNA及蛋白表达的阳性率与性别和年龄大小无关(P>0.05);PFTK1mRNA及蛋白表达的阳性率与肿瘤的浸润深度、组织学分级、是否出现淋巴结转移有关且呈正相关(P<0.05)。3.与正常食管黏膜组织和癌旁不典型增生组织相比,食管鳞癌组织中LRP5mRNA及蛋白表达的阳性率明显增高,其mRNA阳性率分别为8.0%(2/25)、23.8%(5/21)、75.4%(40/53),三者比较差异具有统计学意义(P<0.05),其蛋白表达的阳性率分别为12%(3/25)、38%(8/21)、74.8%(39/53),三者比较差异有统计学意义(P<0.05);LRP5mRNA及蛋白表达的阳性率与患者的性别和年龄大小无关(P>0.05),而与肿瘤的浸润深度、组织学分级、以及是否出现淋巴结转移有关且呈正相关(P<0.05)。4.与正常食管黏膜组织和癌旁不典型增生组织相比,食管鳞癌组织中LRP6mRNA及蛋白表达的阳性率显著增高,其mRNA阳性率分别为0%(0/25)、47.6%(10/21)、79.2%(42/53),三者比较差异具有统计学意义(P<0.05),其蛋白阳性率分别为19%(4/25)、42.8%(9/21)、69.8%(37/53),三者比较差异有统计学意义(P<0.05);LRP6 mRNA及蛋白表达的阳性率与患者的性别和年龄大小无关(P>0.05),而与肿瘤的浸润深度、组织学分级、以及是否出现淋巴结转移有关且呈正相关(P<0.05)。5.与正常食管黏膜组织和癌旁不典型增生组织相比,食管鳞癌组织中VEGF-CmRNA及蛋白表达的阳性率显著增高,其mRNA阳性率分别为4.0%(1/25)、19%(4/21)、62.3%(33/53),三者比较差异有统计学意义(P<0.05),其蛋白阳性率分别为0%(0/25)、23.8%(5/21)、69.8%(37/53),三者比较差异有统计学意义(P<0.05);VEGF-CmRNA及蛋白表达的阳性率与患者的性别和年龄大小无关(P>0.05),而与肿瘤的浸润深度、组织学分级、以及是否出现淋巴结转移有关且呈正相关(P<0.05)。结论:1.食管鳞癌组织中PFTK1、LRP5、LRP6、VEGF-CmRNA及蛋白表达明显升高,提示PFTK1、LRP5、LRP6与VEGF-C四种因子可能参与食管鳞癌的发生。2.食管鳞癌组织中PFTK1与LRP5、LRP6、VEGF-C表达呈正相关,说明PFTK1的异常表达可能通过调控Wnt信号通路中的LRP5、LRP6的表达以及VEGF-C的表达参与食管鳞癌的发生发展。