本文使用新型悬浮生长的细胞的连续培养法从人乳腺癌细胞MDA-MB-435中分离出类肿瘤干细胞株(MDA-435-spheroid enrichment，MDA-435-SE)，并利用流式细胞表面标志检测和裸鼠皮下成瘤实验对MDA-435-SE细胞的类肿瘤干细胞特性进行了验证。然后对MDA-435-SE细胞进行慢病毒感染，建立了稳定敲低Sec23a基因表达的细胞株MDA-435-SE-shSec23a和阴性对照细胞株MDA-435-SE-LV3NC，通过CellCountingKit-8增殖实验、96孔板单克隆成球实验和裸鼠皮下成瘤实验探索Sec23a基因对乳腺癌类肿瘤干细胞MDA-435-SE的干性调控作用。在乳腺癌类肿瘤干细胞MDA-435-SE中敲低Sec23a基因后，细胞的增殖曲线和倍增时间并没有明显改变，但该细胞的体外成球直径明显增大以及单细胞克隆效率均也显著增强。动物实验表明，Sec23a基因的敲低可以显著提高乳腺癌类肿瘤干细胞MDA-435-SE的体内成瘤能力。该课题使用新型悬浮细胞连续培养的方法获得来源于人乳腺癌的类肿瘤干细胞株，并使用体内和体外干性相关实验验证了敲低 Sec23a基因后，可以显著提高乳腺癌类肿瘤干细胞MDA-435-SE的干性，这对乳腺癌类肿瘤干细胞以及肿瘤干细胞的研究具有重要参考价值。