一株蛇足石杉伴生蕨的体外培养和分子鉴定蛇足石杉组织培养初步研究

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石杉碱甲(Huperzia A)是从蕨类植物蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb.)Trev.)分离得到的一种生物碱,是一种高效、可逆、高选择性的中枢乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂,对早老性痴呆(Alzheimer’s disease)、单纯性记忆障碍等神经退行性疾病具有显著的疗效,是治疗早老性痴呆的前景药物。随着越来越多的国家进入老龄化社会,早老性痴呆患者日益增多,对石杉碱甲的需求逐年增加,蛇足石杉的植物资源问题亟待解决。 本课题对蛇足石杉的无性繁殖特性进行了初步研究,并对蛇足石杉组织培养的技术路线及外植体的选择进行了初步摸索。野外采集的蛇足石杉在实验室条件下得到了新生的芽胞(gemma),并对芽胞的形态结构和萌发过程进行了研究。蛇足石杉组织培养的研究表明,由于蛇足石杉体内大量内生菌的存在,根、茎、叶不适合作为组织培养的外植体,芽胞和孢子由于没有内生菌的存在,是开展组织培养的良好材料。芽胞经过表面消毒,在培养基中可观察到新生芽胞的生长。孢子经诱导萌发并形成了原叶体,目前处于原叶体发育的第二阶段,为开展蛇足石杉的组织培养打下了基础。 在蛇足石杉孢子萌发过程中获得的一株蛇足石杉伴生蕨的原叶体,并完成了该植物的体外培养。利用分子生物学手段,并结合形态分类鉴定,确认该植物为沼泽蕨属植物Thelypteris acuminata(Houtt.)Morton。此外,在内生菌与蛇足石杉组织培养关系的研究中,首次从蛇足石杉体内分离到一株蓝细菌类微生物,目前正在开展该微生物的种属鉴定工作。
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