论文部分内容阅读
胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor 1,IGF1)又称生长介素C,是胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factors,IGFs)系统的成员之一。IGF1在动物生长过程中发挥着重要作用,它能够介导生长激素(growth hormone,GH)发挥促生长作用,也能够调节哺乳动物卵巢颗粒细胞的增殖与分化等。课题组前期研究发现IGF1基因启动子区Poly T位点和(CA)n微卫星位点具有多态性,且Poly T位点能够影响IGF1基因的转录活性。在此基础上,以长白猪为研究对象,通过SSR荧光标记检测技术分别对Poly T位点和(CA)n微卫星位点进行基因分型,并结合长白猪的生长性状数据进行关联分析,最后分析四种微卫星单倍型(CA)17-11T、(CA)18-11T、(CA)19-11T和(CA)20-11T对IGF1基因转录活性的影响,具体研究结果如下:(1)通过SSR荧光标记检测共发现猪IGF1基因启动子区存在10T、11T和12T三种等位基因,11T等位基因频率是最高的,为0.89;发现共有四种基因型,分别为10T/11T、11T/11T、11T/12T和12T/12T,其中11T/11T基因型频率最高,为0.8;IGF1基因启动子区的Poly T位点处于哈迪温伯格平衡状态(p<0.05)。与长白猪生长性状关联分析发现:基因型11T/11T在体长、达115kg体重日龄和眼肌面积等生长性状数据有优于11T/12T的趋势。(2)通过SSR荧光标记检测,共发现IGF1基因启动子区的(CA)n微卫星位点有17CA、18CA、19CA和20CA四种等位基因,(CA)18和(CA)19等位基因频率较高,分别为0.44和0.38;共发现十种基因型,分别为(CA)17/(CA)17,(CA)17/(CA)18,(CA)17/(CA)19,(CA)17/(CA)20,(CA)18/(CA)18,(CA)18/(CA)19,(CA)18/(CA)20,(CA)19/(CA)19,(CA)19/(CA)20,(CA)20/(CA)20,其中基因型频率较高的是(CA)18/(CA)18,(CA)18/(CA)19和(CA)19/(CA)19,分别为0.23、0.27和0.16。IGF1基因启动子区(CA)n微卫星位点不处于哈迪温伯格平衡状态(P>0.05);该位点与长白猪生长性状关联分析发现基因型(CA)17/(CA)19和(CA)19/(CA)19在体长、达115kg体重日龄和眼肌面积等生长性状数据普遍优于其它基因型。(3)构建四种单倍型(CA)17-11T、(CA)18-11T、(CA)19-11T和(CA)20-11T双荧光素酶报告载体,转染猪成肌细胞,发现单倍型(CA)19-11T的转录活性最高,显著高于(CA)17-11T(p<0.05),表明不同单倍型的微卫星能够影响IGF1基因的转录活性。(4)综上结果,并将IGF1基因启动子区不同基因型组合(CA)n-Tn与长白猪生长性状进行关联分析发现,基因型组合(CA)19/(CA)19-11T/11T更有利于长白猪生长。