【摘 要】
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本研究以高盐极端环境下的土壤为研究对象，对目前已报道的土壤混合基因组提取与纯化法进行比较研究，探索出了一套高效的高盐极端环境土壤混合基因组的提取、纯化法，能有效获
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本研究以高盐极端环境下的土壤为研究对象，对目前已报道的土壤混合基因组提取与纯化法进行比较研究，探索出了一套高效的高盐极端环境土壤混合基因组的提取、纯化法，能有效获取大片段DNA，且DNA纯度可达到进行分子操作水平的纯度。以构建大片断的宏基因组文库为探索高盐极端环境中的未培养微生物基因资源提供技术平台。
在构建了宏基因组文库的基础上通过高通量的淀粉酶筛选，共筛选到十二个阳性克隆，选取其中的活性最高的编号为L14的转化子进一步研究，DNA测序后核苷酸序列比对的结果表明所获的为一个全新的淀粉酶基因，定义该对该淀粉酶基因为amy14。对Amy14的氨基酸序列比对分析显示，Amy14的氨基酸序列与唾液蛋白酶存在68﹪的同源性。
从Amy14淀粉酶的酶学特性分析表明，Amy14淀粉酶的最适反应温度是70℃，最佳反应pH为8.0，该淀粉酶对Ca2+表现出一定的依赖性，其Ca2+最适浓度是1mol/L，高浓度的Ca2+对酶活起抑制作用，另外，通过Amy14淀粉酶的Na+相关性分析，Na+是酶发挥正常作用不可缺少的影响因素，该Amy14淀粉酶在Na+浓度为1-2mol/L之间能发挥最大的酶活，高浓度的Na+对酶活的抑制作用不是很明显。
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