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本研究应用以减毒沙门氏菌为载体的新型生长抑素基因疫苗,从工程菌保存和免疫两方面开展研究：第一部分通过比较几种保存方法的效果,旨在开发提高DNA疫苗保存效果的方法,第二部分从免疫剂量方面探讨新型生长抑素DNA疫苗喷雾免疫泌乳后期奶牛的效果和安全性,旨在为生长抑素基因疫苗应用于奶牛提供试验依据。1工程菌的保存方法将发酵离心后的600mLpVGS/2SS-asd初始浓度为8.43×1010cfu/mL的菌液按照低温液态保存、低温干燥保存和冷冻干燥保存,菌液分成三个等份,在不同时期使用活菌平板计数法测定细菌存活率。其中低温液态保存探讨了pH(6.8、7.0、7.4、7.8)、保护剂(蔗糖、葡萄糖、海藻糖)及浓度(3%、5%、10%)、菌液浓度(8.43×1010cfu/mL、 8.43×109cfu/mL、8.43 X 108cfu/mL)等条件下的保存效果；低温干燥保存探讨了100g麸皮中加入不同菌液量(1mL、2mL、L、8mL)的保存效果；冷冻干燥保存探讨了不同冷冻保护剂(A、B、C)和初始菌液浓度(8.43 X 1010cfu/mL、8.43 X 109cfu/mL、8.43×108cfu/mL)的保存效果。结果表明,低温液态保存各因素中存活率最高的分别为pH7.0、3%蔗糖、菌液浓度8.43×1010cfu/mL,在相同时期下又以pH7.0存活率最高；低温4℃干燥保存方法中以1%菌液量细菌存活率相对较高,但1周后存活率仅为0.31%,不适合细菌保存；冷冻干燥保存方法中以配方A为冷冻保护剂的细菌存活率高,且初始菌液浓度越高越利于细菌保存。在15天时低温液态保存(pH7.0、未加糖类、菌液浓度8.43×1010cfu/mL)细菌存活率仍有50.2%,优于存活率在15%左右的冷冻保存法,15天以上低温液态保存细菌存活率显著下降,以冷冻干燥保存(冷冻保护剂A、初始菌液浓度8.43×1010cfu/mL)最好。2生长抑素基因疫苗免疫泌乳后期奶牛的研究为了探讨新型生长抑素DNA疫苗-pVGS/2SS-asd对泌乳后期奶牛安全性和泌乳性能的影响以及免疫剂量的关系,选择80头遗传背景和产奶量相对一致的泌乳后期奶牛,分为4组,每组20头。菌液浓度调整为1×1010cfu/mL,每天2次,分高(每次15mL)、中(每次10mL)、低(每次5mL)三种剂量处理奶牛,对照组(每次10mL)鼻饲10%铝胶生理盐水。结果表明pVGS/2SS-asd生长抑素DNA疫苗经过免疫后7天的连续观测对奶牛无安全性影响；免疫12周后仍可检出抗体,中剂量组在诱导产生抗体效价水平和抗体阳性牛的比例优势明显；各剂量组均有一定程度促进奶牛泌乳,低剂量组表现突出,第2周时相比对照组提高了2kg/d；各剂量组在4周前可提高乳脂率和蛋白率,对体细胞数无影响,以中剂量组最为明显。