蟹膜修复神经鞘瘤所致10mm坐骨神经缺损的实验观察

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周围神经损伤,是临床上的常见病及多发病,肿瘤所致的周围神经损伤在临床上亦较常见,临床上直接将缺损的神经直接缝合,但易导致神经假瘤的形成而影响神经的功能恢复,尤其中长段神经缺损(≥10mm),因张力过大而无法直接缝合,而临床上采用的自体神经移植后,导致移植区域出现失神经症状,所移植的神经也无法达到理想的恢复状态,从而导致临床对神经缺损治疗较为棘手。随着交通化快节奏的生活方式改变,导致周围神经损伤发病率呈逐年上升状态,神经缺损严重的影响了人们的生活和工作质量。因此,中长段周围神经损伤的临床治疗成为了神经移植研究领域里的重要课题。近些年,随着生物医学的迅猛发展,神经导管已成为神经移植方面的佼佼者,尤为生物可降解型导管的发展,已成为神经移植领域里的领军者,它为临床神经移植奠定了坚实的基础,但此型生物导管费用较高,亦存在排斥反应,因而导致临床上应用较为困难。蟹膜(即螃蟹蟹鳌内的一层较为坚韧的透明膜,简称蟹膜),实属原生物可降解型材料,本课题采取人工方法建立神经鞘瘤的大鼠模型,将蟹膜移植在大鼠坐骨神经缺损处(神经缺损≥10mm),以观察蟹膜对周围神经缺损的修复作用,亦为再续的实验研究奠定坚实的基础及理论依据。目的:观察蟹膜修复神经鞘瘤所致10mm坐骨神经缺损的神经再生与功能恢复情况,并探讨蟹膜对神经缺损的修复作用,并为后续的实验研究奠定坚实的基础及确凿的数据。方法:1制备神经鞘瘤模型:选取清洁级SD大鼠16只,将所有大鼠的右侧坐骨神经切断后进行端端缝合术,术后4周即可形成神经鞘瘤模型,再将所有大鼠完全随机分成两组,即蟹膜A组和坐骨神经缺损B组。2蟹膜准备:选取蟹鳌较大的10只新鲜河蟹,将蟹鳌内的透明膜用生理盐水浸泡去除其表面的杂质后,放置无菌的EP管内,于-80℃的超低温冰箱进行冷冻72小时,以去除蟹膜内的抗原成分,再将蟹膜于常温室内(温度为20-25°)进行复温48小时后实验备用。3两组均先将神经鞘瘤切除(使神经缺损达到10mm),A组用蟹膜进行桥接两端缺损处的神经,B组将两端缺损处的神经直接缝合于邻近的腹壁上,观察两组缺损神经的生长与功能恢复等状况。4术后观察大鼠的大体状况,于术后30分钟内,以及第2、4、6、8、10、12周采用足迹测量法进行坐骨神经指数的测定,于术后4、8、12周时于手术显微镜下观察两组神经生长状况,12周时行大体标本、神经电生理等方面检测,并将A、B两组进行比较。结果:1大体观察:术后30分钟内观察:所有大鼠均出现右后足下垂、右趾并拢等拖拽右后肢行走的瘫痪状态,针刺所有大鼠的右足(趾),无右足(趾)回缩动作、无展爪反射形成。术后3周起,逐渐出现较迟钝的右足(趾)回缩动作及展爪反射;6-10周大部分大鼠的右足(趾)回缩动作及展爪反射已逐渐趋于较灵敏状态;11周时蟹膜A组所有8只大鼠的右足(趾)回缩动作及展爪反射已灵敏,右后肢自主活动与正常侧一致;12周时坐骨神经缺损B组有2只大鼠的右足(趾)回缩动作及展爪反射已灵敏,右后肢自主活动与正常侧一致,3只为稍灵敏状态,3只为较迟钝状态。2手术显微镜下观察:术后4周:A、B两组均与周围组织粘连,A组重于B组;8周:A组轻于B组,剪开A组导管可见再生的神经纤维和远端已连接,且开始降解吸收;12周:A、B两组的再生神经纤维全部长入远端,蟹膜组降解吸收完毕且无明显粘连,神经连续性良好,B组导管可见神经假瘤形成,使神经再生通过障碍。A组再生神经恢复效果明显优于B组。3坐骨神经指数:于术后30分钟内,术后第2、4、6、8、10、12周时进行大鼠坐骨神经指数测量并与之比较:在30分钟内两组一致,2、4周时两组无明显差别,而在第6、8、10、12周,尤其是12周时两组具有显著性差别,A组较B组明显加快。4电生理及再生形态学:术后12周两组进行电生理、再生神经形态学比较:A组大鼠在传导速度、最大振幅、有髓神经轴突直径、髓鞘厚度及纤维密度上明显高于B组大鼠。注:传导速度与B组相比较,(P<0.01);最大振幅与B组相比较,(P<0.01);有髓神经轴突直径与B组相比较,(P<0.01);髓鞘厚度与B组相比较,(P<0.01);纤维密度与B组相比较,(P<0.01)。结论:蟹膜能显著促进神经鞘瘤所致10mm坐骨神经缺损后的神经再生与功能恢复,对缺损的坐骨神经具有积极促进的再生作用。
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