论文部分内容阅读
脓毒症(sepsis)是因感染等原因造成的全身性炎症反应综合症（systemic inflammatory response syndrome，SIRS），证实有细菌存在或有高度可疑的感染灶，通常是各种严重烧伤、创伤、再灌注损伤、休克及外科大手术后常见的并发症。由脓毒症进一步发展所导致的脓毒症休克(septic shock)和多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunctionsyndrome，MODS)是导致临床重症监护室(ICU)危重患者死亡的重要原因，死亡率高达30％～50％。 白细胞介素-11(interleukin-11，IL-11)是由人类多种基质细胞，如成纤维细胞、上皮细胞和成骨细胞等分泌的一种多功能细胞因子，其对造血的多个方面具有作用，尤其是对巨核细胞具有重要的调控作用。IL-11临床上主要用于实体瘤、非髓系自血病化疗后血小板减少症的治疗。研究表明，IL-11具有负向免疫调节功能等。 目的: 本研究主要探讨白细胞介素-11(IL-11)对脓毒症模型动物的保护作用及其机制，为临床应用IL-11治疗脓毒症提供实验依据。 方法: (1)采用盲肠结扎和穿刺(CLP)建立脓毒症小鼠模型; (2)雄性C57BL/6小鼠共18只，分为正常对照组、假手术对照组、模型组和实验治疗组，每组6只。治疗组小鼠术前2天和术后7天每天皮下注射重组人白细胞介素-11(recombinant hunman interleukin-11， rhIL-11）400μg/Kg/d，其它三组注射同等体积的溶剂，观察分析小鼠7d生存情况; (3)雄性C57BL/6小鼠共12只，分为假手术组、药物对照组、模型组和治疗组，术前2d及术前2h给予药物对照组和实验治疗组小鼠皮下注射rhIL-11，剂量为400μgKg，其它两组小鼠给予皮下注射同等体积的溶剂，观察术后24 h各组小鼠脏器系数、组织病理学、生化指标及炎症因子表达水平; (4)按(3)设置各组，术前2d及术前2h给予药物对照组和治疗组小鼠皮下注射rhIL-11，剂量为400μg/Kg，其它两组给予皮下注射同等体积的溶剂，观察术后24 h各组小鼠脾脏免疫细胞群体变化和各类细胞因子表达水平。 结果: (1)成功构建了C57BL/6小鼠脓毒症模型; (2)生存分析显示，模型组小鼠7d生存率为0，治疗组小鼠7d生存率为67％，表明rhIL-11能有效降低CLP诱导的脓毒症小鼠的死亡率; (3)病理切片、生化指标及炎症因子表达水平显示，治疗组小鼠较模型组小鼠肝细胞损伤明显减轻，血清ALT、AST水平和肝脏炎症因子表达水平下降，表明rhIL-11对脓毒症介导的小鼠肝损伤具有一定的保护作用; (4)肝脏非实质细胞流式分析显示，治疗组小鼠肝脏中CD11 b+Gr-1 intMDSCs增多，表明rhIL-11对脓毒症介导小鼠肝损伤的保护作用可能是通过上调MDSCs实现的; (5)脾脏细胞因子水平显示，治疗组小鼠炎症因子的产生较模型组小鼠显著减少，而抑制炎症的细胞因子产生增多，表明rhIL-11能减少CLP诱导脓毒症小鼠的炎症反应; (6)脾脏免疫细胞群体流式分析显示，治疗组小鼠CD4+T、CD8+T细胞及NK细胞减少，DCs数量增多，表明rhIL-11具有促进髓系造血的作用，但同时能减少抗原提呈对象的数量，总体下调免疫应答。 结论: rhIL-11对CLP诱导脓毒症小鼠具有明显的保护作用，尽管rhIL-11动员髓系造血上调了DCs的数量，但其作用后下调了CD4+T、CD8+T细胞、NK细胞比例，同时抑制脓毒症小鼠体内各种促炎细胞因子的产生及促进抑炎细胞因子的产生，总体抑制脓毒症引起的急性免疫炎症反应，从而逆转脓毒症介导的器官损伤。