论文部分内容阅读
红花注射液是临床上心血管疾病常用药物,药效明确,是山西省重点中医药品种。由于红花注射液采用的是水提醇沉工艺,导致了生产上产生大量药渣。前期我们从红花药渣中制备出了一类总亚精胺含量在50%以上的亚精胺有效部位提取物,并且在小鼠悬尾和小鼠强迫游泳实验中初步显示出了抗抑郁作用,但是该提取物确切的抗抑郁作用和作用机理仍是未知的。因此,本课题进一步采用慢性温和不可预知应激(CUMS)大鼠抑郁模型评价亚精胺有效部位提取物的抗抑郁作用效果,并从单胺类神经递质调节和HPA轴功能调控、代谢组学等方面探讨亚精胺有效部位提取物的抗抑郁作用机制。主要内容如下:1、通过CUMS抑郁模型对亚精胺有效部位提取物进行抗抑郁作用研究,结果显示亚精胺有效部位提取物高、中剂量组(34.6 mg/kg、17.3 mg/kg)均能显著提高CUMS抑郁样大鼠的糖水偏爱率(P<0.01);亚精胺有效部位提取物中剂量组(17.3 mg/kg)能够显著增加旷场实验中穿越格数和直立次数(P<0.05,P<0.01),显著减少离开中央格时间(P<0.05);亚精胺有效部位低提取物中剂量组(17.3 mg/kg)能够显著降低CUMS大鼠强迫游泳不动时间(P<0.05)。表明亚精胺有效部位提取物能够明显改善CUMS模型引起的抑郁样行为,说明其具有较明显的抗抑郁作用。2、从单胺类神经递质和HPA轴两方面对亚精胺有效部位提取物的抗抑郁作用机制进行初步探讨。运用超高效液相色谱-三重四极杆质谱方法(UHPLC-MS/MS)方法检测大鼠海马中单胺类神经递质含量的变化,结果表明亚精胺有效部位提取物高、中剂量组(34.6 mg/kg、17.3 mg/kg)可以显著增加5-HT和NE代谢途径的神经递质含量(P<0.05,P<0.01)。运用酶联免疫印迹法(ELISA)测定了大鼠血清中HPA轴相关激素(ACTH、CRH、CORT)的含量变化,结果显示:亚精胺有效部位提取物高、中、低三个剂量组(34.6 mg/kg、17.3 mg/kg、8.65mg/kg)均可以显著逆转由于CUMS造模引起的激素含量异常的情况(P<0.01)。3、运用~1H-NMR代谢组学研究亚精胺有效部位提取物对CUMS抑郁样大鼠血清代谢物的影响。PCA和OPLS-DA统计结果表明模型组与空白组能够明显分开,说明CUMS造模是可信的。进一步通过S-plot图结合P<0.01筛选得到10个与抑郁症相关的差异代谢物:N-乙酰糖蛋白、异亮氨酸、乳酸、O-乙酰糖蛋白、丙氨酸、胆碱、谷氨酸、乙酸盐、氧化三甲胺和肌酸。最后,对差异代谢物进行分析获得4条与抑郁症相关通路,其中D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢通路可能是亚精胺有效部位提取物发挥抗抑郁作用的主要通路。