本论文主要包括两部分，第一部分是以自制的接枝型硅胶为基质，制备了疏水色谱固定相，考察了填料的色谱性能，并将其应用于胰蛋白酶的分离纯化，取得较满意的结果。第二部分是采用羰基咪唑的方法制备了两种生物色谱固定相，分别考察了这两种填料的分离性能并将其应用于中草药中活性成分的筛选，取得了良好的结果。　　 本论文分为了四个部分：　　 1.以自制的甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)接枝硅胶为基质，采用新的化学改性方法制备了新型疏水相互作用色谱固定相(HIC)，并用于生物大分子的分离。详细考察了其疏水特征以及初始盐浓度、pH值、流速、温度等因素对蛋白在色谱柱上保留时间的影响；结果表明，该高效疏水作用色谱填料的分离性能优良，基线分离六种标准蛋白，吸附容量高达36mg.g-1，详细研究了该疏水柱的热力学性能，热力学数据可以真实地反映出蛋白质在HIC中的保留由熵控制。最后将该填料应用于粗胰蛋白酶的纯化，纯化后的胰蛋白酶经SDS-PAGE电泳验证其纯度高达95％以上。　　 2.以硅胶为基质，采用羰基咪唑法合成了人血清白蛋白(HSA)固定相，考察了HSA生物色谱柱对小分子药物的分离性能，以及pH值和温度对小分子药物保留的影响。并用该色谱模型对铁棒锤中活性成分进行了筛选，利用MS对筛选出的四种活性成分进行结构鉴定。从而建立了一种从中药复杂体系中快速、高效的筛选活性成分的生物色谱方法。　　 3.采用前沿洗脱的方式考察了辛克宁与固载化HSA的相互作用，发现随着温度的升高，二者的结合位点逐渐降低，可能由于温度的升高，辛克宁与固载化HSA之间的相互作用力(色散力、静电力和氢键力等分子键作用力)减弱，致使活性位点的减少。期望以此为其它中药活性成分与蛋白质作用过程的研究提供一定的借鉴。　　 4.用亲和层析法纯化得β-肾上腺素受体，并将其固定于硅胶表面制备了受体色谱固定相。用前沿色谱法测定了硫酸沙丁胺醇、重酒石酸去甲肾上腺素和盐酸普萘洛尔与β2-AR的结合常数。结果表明，受体色谱固定相上的β2-AR与药物的结合常数顺序与文献报道一致，说明β2-AR经过纯化、固定化、装柱等操作后，依然保持其原有的活性。然后将制备的受体色谱固定相应用于丹参活性成分的筛选。结果表明，该受体色谱同定相筛选出了丹参中与β2-AR作用的活性成分，说明该色谱法为中药有效成分的筛选提供了一种新的技术与方法。