能源林树种乌桕组织培养技术体系的研究

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乌桕(Sapium sebiferum Roxb.)属于大戟科乌桕属,是一种经济价值较高的木本油料树种。其种子中的油脂,可用作食用油源、工业油源和动力油源,是一种可再生能源。当前石油价格高涨,寻找可再生能源是当前世界上重要课题之一,乌桕作为一种可再生能源植物,得到了广泛的重视。乌桕能源林培育需要大量种苗,迅速经济地繁殖大量的乌桕优质种苗成为当前林业上亟待解决的问题。本研究以乌桕的带腋芽茎段、幼嫩茎段和叶片为外植体,探索了各外植体培养的最佳激素配比,系统地研究了带腋芽茎段无菌苗体系的过程及影响因素。主要研究成果如下:初代培养时,不同外植体的消毒方法也不相同。幼嫩节段消毒的最佳方法是70%酒精30 s+0.1%HgCl2 8 min,其污染率为25.5%;较老节段的最佳消毒方法是70%酒精30 s+0.1%HgCl2 10 min,其污染率为26.5%;种胚消毒用70%酒精30 s+0.1%HgCl23 min效果最好,污染率为18.6%,存活率可达57.3%;叶片消毒用70%酒精30 s+0.1%HgCl25 min消毒,存活率可达34.3%。带腋芽茎段可以诱导腋芽萌发有效芽,最佳的培养基配方为WPM+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05 mg/L,诱导率可达62.9%,最早3 d就能启动。在培养基中加入赤霉素(GA3)2.0 mg/L,可有效的增加腋芽萌发的生长长度。幼嫩的茎段还可以诱导不定芽,在培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L下培养,不定芽诱导率可达51.9%。为保证最佳的诱导率,取材时间以4月到5月效果最好。乌桕初代培养中的褐变现象较严重,在培养基中添加500 mg/L PVP和适时的更换培养基都可以显著地控制褐变。胚轴和叶片愈伤组织的诱导在先暗后光培养条件下较好,愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L,诱导率为53.6%;叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L,诱导率为38.2%。在继代增殖培养中,MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/l+NAA 0.5 mg/L培养效果较好,诱导率为81.2%,增殖系数为3.2。在生根培养中,加入生长调节剂萘乙酸、吲哚乙酸都能生根,且生根率均很高。实际操作中组培苗生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L,培养基中附加2 g/L活性炭,生根率可为97.4%,且根生长粗壮,主根数大于4条,利于移栽。生根苗移栽到河沙:营养土(1:1)的基质中成活率最高为83.3%。
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