环介导等温扩增技术在肺部感染性疾病常见病原体检测中的运用

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目的建立运用环介导等温扩增芯片技术,对常见肺部感染疾病患者的痰液进行快速12联检测(11种常见细菌+结核分枝杆菌),探讨该技术在西藏常见肺部感染的病原菌检测中的运用价值。方法收集西藏拉萨自治区人民医院2017年3月至2018年10月均诊断为肺部感染性疾病患者的合格痰标本108例(含13例肺部感染合并肺结核患者),所有患者均进行环介导等温扩增技术(Lamp)的12联检测(包括:肺炎链球菌,金黄色葡萄球菌,肺炎克雷伯菌,流感嗜血杆菌,鲍曼不动杆菌,铜绿假单胞菌,大肠埃希氏菌,嗜麦芽窄食单胞菌,嗜肺军团菌,肺炎支原体,肺炎衣原体,以及结核分枝杆菌复合群)和痰培养,所有结核可疑患者均进行抗酸染色检测,并搜集患者的一般资料、生化结果、临床情况等。比较Lamp结果与痰培养、抗酸染色的结果的差异,结合患者的住院时间、合并症以及年龄等对我院肺部感染性疾病进行整合分析。了解Lamp在西藏常见肺部感染性疾病的病原学检查的有效性,探索此方法运用在西藏地区肺部感染性疾病致病菌检测方面的新方式。结果1.95例肺炎患者的合格痰标本LAMP共检测出病原菌57株,阳性率是60.0%,其中任一病原体阳性的患者有44人,其中细菌占86.0%(49/57),以肺炎链球菌及金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌为主,革兰氏阳性菌占67.3%(33/49),革兰氏阴性菌以流感嗜血杆菌为主,非典型病原体占14.0%(8/57,均为肺炎支原体)。痰培养方法共检测出病原菌13珠(排除口腔等定植的真菌),阳性率13.7%(13/95),以肺炎链球菌,金黄色葡萄球菌,流感嗜血杆菌和鲍曼不动杆菌为主,未培养出非典型病原体。革兰氏阳性菌占61.5%(8/13),革兰氏阴性菌以流感嗜血杆菌为主,这与LAMP结果大致一致。13例肺炎合并肺结核患者,LAMP检出结核分枝杆菌有7例,阳性率为53.8%,检测出细菌6珠,抗酸染色阳性有3例,阳性率为23.1%,检测出细菌1珠。2.LAMP检测出肺炎中混合感染患者有12例,占12.6%(12/95),以2种细菌混合感染为主,痰培养未检测出混合感染者。3.LAMP每种菌株只与其相应的DNA反应,相互之间无交叉反应,特异性较高。4.LAMP能检测出难以培养的细菌,如非典型病原体及结核分枝杆菌等。结论环介导等温扩增技术与痰培养和抗酸染色相比,可以更方便、快速、准确的检测出常见肺部感染的病原菌与结核分枝杆菌,尤其对难以培养的细菌更有优势,LAMP结果观察到革兰氏阳性菌为我院肺部感染的主要病原菌,此次研究为LAMP在西藏地区的开展与研究打下了一定的基础。
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