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目的：MicroRNA (miRNA)是一种长度约为22 nt的非编码RNA,其主要通过碱基互补与靶mRNA的3’端非翻译区(3’UTR)结合,导致靶mRNA降解或抑制蛋白质的合成,在转录后水平调节基因的表达。miRNA突变、缺失或表达水平的异常会导致生理的异常与疾病的发生,与人类肿瘤疾病密切相关,它具有类似于癌基因或抑癌基因的作用,可参与肿瘤细胞的增殖、分化和细胞凋亡等调控过程。miRNA在乳腺癌肿瘤诊断和治疗方面具有广阔的应用前景。我们采用实时荧光定量检测乳腺癌及癌旁正常组织中miRNA的差异表达,进行靶基因预测其靶点,探讨其在乳腺癌发生发展中的机制。方法：收集乳腺癌组织及癌旁乳腺组织20对,癌旁正常组织选取非同一象限、距离癌组织肿块边缘至少5cm以上的乳腺组织作为癌旁乳腺组织。分别提取总RNA、逆转录以及进行miRNA-10b、miR-126、miR-335的实时荧光定量检测。结果进行统计学处理和分析。最后结合生物信息学方法应用互联网上miRNA预测软件在线服务站点,输出差异性表达miRNA的预测靶基因,取至少3个miRNA靶基因软件预测出的基因作为靶基因证实确有其调控的靶基因,并为进一步的研究提供基础。结果：1.经过实时荧光定量检测,乳腺癌组织中miR-10b表达量显著低于正常组织中miR-10b表达量,P=0.0036；2.经过实时荧光定量检测,乳腺癌组织中miR-126表达量显著低于正常组织中miR-126表达量,P<0.0001；3.经过实时荧光定量检测,乳腺癌组织中miR-335表达量显著低于正常组织中miR-335表达量,P<0.0001；4.比较正常组织中的miR-10b表达水平与怀孕次数之间的关系提示：怀孕次数越多的妇女,正常组织中的miR-10b表达越高(P=0.0069；相关系数=0.5978)；5.比较正常组织中的miR-335表达水平与怀孕次数之间的关系提示：怀孕次数越多的妇女,正常组织中的miR-335表达越高(P=0.0371；相关系数=0.59242)；6. miRNA-126的表达水平与患者的年龄、怀孕的次数、生产次数、哺乳最长时间、共哺乳时间、肿瘤大小、TMN分期、肿瘤分期、淋巴结转移、雌激素受体、孕激素受体、Her-2、P53以及ki-67等临床指标均未发现明显有相关性。结论：该实验最终经过实时荧光定量检测,我们发现乳腺癌组织中miR-10b、miR-126、miR-335的表达水平较癌旁正常乳腺组织中表达明显下调,差异有统计学意义,结果与国外学者的研究相类似,miR-10b、miR-126、miR-335可能在乳腺组织中作为一种抑癌基因起抑制肿瘤细胞的作用。我们还发现,怀孕次数越多的妇女,正常组织中miR-10b和miR-335的表达量越高,提示怀孕次数可能会影响乳腺组织中miR-10b及miR-335的表达。而miRNA-126在乳腺癌及癌旁正常组织中的表达水平与患者的年龄、怀孕的次数、生产次数等临床指标没有明显相关性。