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目的： 系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）是儿科临床常见的肾小球病变，以系膜细胞(GMC)异常增殖及其继发炎症介质释放为主要病理特征，是导致肾小球硬化、使肾小球疾病走向终末期的中心疾病环节之一。体内外研究均证实血管紧张素II（AngII）可诱导肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质分泌，并介导GMC的增殖与细胞收缩调控。TRPC6作为膜钙离子通道之一，调控 Ca2+浓度，目前研究TRPC6与肾脏疾病相关，主要是在足细胞方面，与家族性局灶性节段性肾小球硬化、蛋白尿等密切相关，而在细胞增殖性方面的研究较少见。在细胞水平上直接观察AngII及AT1RA对GMC增殖及TRPC6与Ca2+变化相关性的报道很少。本课题通过观察肾小球系膜细胞（GMC）在AngII诱导下细胞的增殖状况、TRPC6表达及细胞内 Ca2+的变化，并检测氯沙坦（Losartan）、泼尼松（Prednisone）的干预效应，探讨Ca2+与TRPC6在AngII诱导的GMC异常增殖中的作用及氯沙坦的干预效应。 方法： 在相差显微镜下观察GMC生长的状态、外形、生长特点、排列方式等，予免疫荧光染色鉴定细胞。用不同浓度AngII（0、10-8、10-7、10-6、10-5mol/L）在不同时间（0h、24h、48h、72h）刺激细胞，采取MTT法及台盼蓝法检测细胞增殖状况。以 AngII10-7mol/L作用24h建立细胞模型，并予 Losartan、Prednisone干预后，分为四组（N组：空白对照组；A组：AngⅡ10-7mol/L组；LT组：AngⅡ10-7mol/L+Losartan10-5mol/L；Pred组：AngⅡ10-7mol/L+Prednisone10-5mol/L），测细胞增殖程度，免疫荧光检测TRPC6分布，RT-PCR、Western Blot检测TRPC6表达，以及激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+变化。 结果： AngII作用0-48h促进GMC增殖，此后GMC虽呈增长趋势，但作用强度明显减弱。AngII10-8mol/L无明显增殖作用，AngII10-7mol/L诱导GMC增殖明显，AngII10-6—10-5mol/L细胞增殖减弱，活力降低。AngII10-7mol/L诱导24h GMC增殖明显，且细胞内TRPC6分布异常，其表达及Ca2+浓度升高，趋势与细胞增殖一致。Losartan显著抑制GMC增殖，改善细胞内TRPC6的分布，均抑制TRPC6表达及降低细胞内 Ca2+的变化。泼尼松抑制 GMC增殖的同时，对细胞 TRPC6表达及Ca2+均无明显影响。 结论： 1. AngII诱导GMC增殖具有一定的时间-剂量依赖性，增殖活跃的细胞呈放射状，聚集成小丘状，以24h AngII10-7mol/L为著，建立肾小球系膜细胞增殖模型。 2. TRPC6mRNA和蛋白水平在肾小球系膜细胞增殖中表达上调，且分布异常，为从离子通道的角度探讨肾小球系膜细胞增殖的分子机制提供实验基础。 3.肾小球系膜细胞增殖中Ca2+升高与TRPC6表达升高趋势相一致，提示TRPC6通过介导Ca2+升高促进系膜细胞增殖。 4.氯沙坦抑制GMC增殖，降低TRPC6表达及Ca2+水平，提示AngII诱导GMC增殖通过AT1R介导TRPC6引起Ca2+升高有关。泼尼松抑制GMC增殖，但增殖效应不一定都由Ca2+引起，可能通过阻滞细胞周期而起作用。