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目的:本文采用为期2周的尾部悬吊大鼠做废用性肌萎缩模型在实施抗阻训练和补充维生素E联合干预手段之后观察大鼠比目鱼肌、腓肠肌丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的抗氧化能力的变化表达和钙镁ATP酶活性变化表达,旨在探讨抗阻训练、补充维生素E和抗阻训练结合维生素E三种干预对废用性肌萎缩大鼠腓肠肌恢复作用机制,同时为废用性肌萎缩恢复选择有效的运动形式、增强其抗氧化能力提供科学方法和理论依据。
材料和方法:本研究选取3月龄健康雄性SD种大鼠35只为研究对象。随机抽取5只大鼠作为对照组,其余30只大鼠作为去负荷组.悬吊2周后,去负荷组再次称重记录后随机分为6组:模型组、抗氧+悬吊组、自由活动组、抗氧组、抗氧+抗阻训练组和抗阻训练组。模型组、抗氧+悬吊组大鼠在解除悬吊、称重后即处死。自由活动组大鼠解吊后,标准饲养笼内普通饲养;抗阻训练组大鼠做抗阻训练为期2周;抗氧组做为期2周的补充维生素E;抗氧+抗阻组大鼠给予补充维生素E和做抗阻训练,2周后24-48小时,快速取大鼠双侧后肢比目鱼肌、腓肠肌,称重、编号,放入经质量分数0.1[%] 焦碳酸二乙酯(diethypyrocarbonate,DEPC)预先处理过的Eppendorf管中,置于液氮速冻,-80℃保存,备用。采用硫代巴比妥酸比色法检测比目鱼肌、腓肠肌MDA值、比色定量法检测腓肠肌GSH值、钼铵定磷法测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低、考马斯亮兰测定肌肉蛋白含量,利用公式计算各指标含量数据。实验数据用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS11.5统计分析软件进行统计分析,各组之间的差异性用单因素方差分析和多重比较统计,P<0.05为差异有统计学意义。
结果:
1.空白对照组大鼠腓肠肌湿重体重比低于其他各组,差异均有统计学意义;抗氧+抗阻组高于其他各组,且差异均有统计学意义。
2.大鼠腓肠肌MDA模型组高于其他各组,差异均有统计学意义;抗氧组低于抗氧+抗阻组、抗阻组,但差异无统计学意义。
3.大鼠腓肠肌GSH抗氧组高于其他各组,与模型组、对照组、抗阻组、抗氧+悬吊组、自由活动组相比较差异有统计学意义。
4.大鼠腓肠肌抗氧组钙镁ATP酶活力值高于其他各组值,且与模型组、抗氧+悬吊组、自由活动组、抗氧+抗阻组差异有统计学意义。
结论:
1.采用尾部悬吊2周建立废用性肌萎缩动物模型具有可靠性,且效果良好,尤其是在肌萎缩恢复期,采用抗氧化剂和抗阻训练对腓肠肌都有效果,其中以抗氧加抗阻训练方案恢复效果最好。
2.补充维生素E干预手段对废用性肌萎缩大鼠MDA脂质过氧化物恢复效果好,为运动处方的制定提供了新思路。三种恢复干预手段来看,抗氧组的细胞保护程度好,抗氧加抗阻组次之,抗阻组最差。表明脂质过氧化物对其起了重要作用,与之前的预期效果一致。
3.抗阻训练、补充维生素E产生的抗氧化剂GSH都促进废用性肌萎缩大鼠腓肠肌的恢复。从抗氧组、抗阻组和抗氧+抗阻组三种恢复干预手段来看,促进废用性肌萎缩恢复抗氧组最好,抗氧+抗阻组次之,抗阻组最差。本研究中补充维生素E的剂量能有效提高机体的抗氧化能力。
4.补充维生素E对废用性肌萎缩大鼠腓肠肌钙镁ATP酶活力有促进骨骼肌内钙稳定的作用。抗氧组和抗阻组的酶活性达到并超过对照组水平,恢复效果显著。模型组钙镁ATP酶活性最高,说明影响肌肉收缩,最终导致废用性肌萎缩效果明显,同时也证明所建立的废用性肌萎缩模型的有效性。