螺旋霉素生物合成过程影响因子的研究

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近年来的研究表明,螺旋霉素对一些新发现的感染有着良好的疗效,使得它再次成为医疗界关注的焦点。但是国内螺旋霉素生产率较低,与国外相比还有很大的发展空间。因此,本课题主要从发酵工艺着手来提高螺旋霉素产率。 在摇瓶培养基中分别添加丙三醇、硫酸亚铁和磷酸镁均能提高螺旋霉素的效价,本文考察了这些有利因素的最佳添加浓度和最适添加时间,分别为:丙三醇于0h添加0.08%,硫酸亚铁于72h添加1.5g/L,以及在48h添加磷酸镁1.35g/L均能提高效价20%~40%,而且在15L和50L发酵罐上的放大实验也成功地验证了它们确实能有效的提高最终效价。 在放大实验中,分别测定了发酵液中多种有机酸的含量,呼吸链上的琥珀酸脱氢酶和过氧化氢酶的比活,以及发酵液中铵离子浓度,分析出丙三醇、硫酸亚铁和磷酸镁在螺旋霉素生物合成过程中的作用机理。丙三醇主要增加了EMP途径和TCA循环的代谢流,在发酵初期可能有助于激活菌体,促进细胞的初级代谢:硫酸亚铁可提高呼吸链相关酶的比活,促进呼吸作用为代谢提供大量自由能;磷酸镁是铵离子捕集剂,能有效限制铵离子浓度对内酯环合成的抑制。 优化原始培养基的有机氮源,用棉籽蛋白替代鱼粉,有效地提高了螺旋霉素的效价;在新配方中检验了丙三醇和硫酸亚铁的积极效应。
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