刺梨抗氧化抑菌作用的谱效关系研究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zhujiang_doctor
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目的:以刺梨为研究对象,对其抗氧化及抑菌作用的谱效关系进行研究。将刺梨不同极性部位提取物的HPLC指纹图谱和刺梨抗氧化抑菌药效数据相结合,采用偏最小二乘法、灰色关联度法获得刺梨抗氧化、抑菌作用的谱效关系;考察刺梨不同极性部位样品HPLC指纹图谱共有峰对刺梨抗氧化、抑菌作用的相关性,确定各成分峰对药效的贡献;初步阐明刺梨不同极性部位抗氧化、抑菌作用的药效物质基础。方法:通过考察HPLC色谱条件确立刺梨不同极性部位样品的指纹图谱;采用DPPH法和ABTS法研究刺梨不同极性部位样品的抗氧化活性;采用抑菌圈法研究刺梨不同极性部位样品对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、普通变形菌、铜绿假单包杆菌5种细菌的抑菌作用;采用偏最小二乘法、灰色关联度算法将刺梨的“谱”与“效”相关联,构建刺梨抗氧化抑菌的谱效关系模型,研究刺梨不同极性部位样品共有峰对刺梨抗氧化、抑菌药效的贡献。结果:建立了刺梨5种极性部位样品的指纹图谱,标定了20个共有峰并指认了5个共有峰,分别是1号峰抗坏血酸、5号峰没食子酸、7号峰原儿茶酸、16号峰鞣花酸、17号峰芦丁;5种极性部位样品对DPPH自由基的清除效果为乙酸乙酯部位>正丁醇部位>水部位>甲醇部位>乙醇部位,乙酸乙酯部位对DPPH自由基的清除效果最好(EC50=2.46),与对照品Vc的清除作用相当(EC50=2.26);5种极性部位样品对ABTS自由基的清除效果为乙酸乙酯部位>正丁醇部位>甲醇部位>乙醇部位>水部位,乙酸乙酯部位对DPPH自由基的清除效果最好(EC50=23.33μg/ml);刺梨5种极性部位样品均对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和普通变形菌有抑制作用,刺梨甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯部位对粪肠球菌有抑制作用,刺梨水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯部位对铜绿假单包杆菌有抑制作用(抑菌圈≥7mm);灰色关联度结果表明,刺梨不同极性部位样品是通过其内部“有效组分群”来达到抗氧化作用和抑菌作用的,影响较大的几个共有峰对DPPH自由基清除率关联度排序为:16>10>17>8>9>13>4,对ABTS自由基清除率关联度排序为15>8>12>13,对抑制金黄色葡萄球菌关联度排序为:3>13>18>17,对抑制枯草芽孢杆菌关联度排序为16>10>15>8,对抑制粪肠球菌关联度排序为10>16>8>9>17,对抑制普通变形菌关联度排序为6>16>9>13>15,对抑制铜绿假单胞菌关联度排序为13>3>17>18>4;偏最小二乘法结果表明刺梨共有峰对DPPH自由基清除率贡献程度排序为11>4>8>1>19>7>5>13>12>15>17>13>18>9>10,对ABTS自由基清除率贡献程度排序为11>15>19>7>12>5>1>8>4>10>13>3>17>2>20>16,对抑制金黄色葡萄球菌贡献程度排序为18>4>8>14>11>2>9>10>12>15>19>1>7,对抑制枯草芽孢杆菌贡献程度排序为16>20>13>3>17>5>6>12>15>1>7>19>10>2,对抑制粪肠球菌贡献程度排序为16>20>2>14>10,对抑制普通变形菌贡献程度排序18>6>9>17>4,对抑制铜绿假单包杆菌贡献程度排序为16>6>9>17>4>18>14>12>1>20>13>10>19>15>7>5>8。结论:刺梨不同极性部位指纹图谱可用于刺梨质量控制和评价,刺梨对DPPH自由基和ABTS自由基的清除作用、对5种细菌的抑制作用是多种成分共同作用的结果,通过谱效关系可以确定中药药效作用的“有效组分群”,对中药的质量评价和药效学研究提供新方法。
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