分子印迹技术在三种天然活性成分研究中的应用

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MIPs由于其高度特异性、制备简单、成本低等优点,因此在医学和药学领域中得到广泛应用。本文合成了三种不同类型的MIPs材料,将其用于果汁脱苦、代谢产物的富集以及从复杂体系中同时富集多种目标化合物。本文旨在进一步研究和探索分子印迹技术在复杂体系中的应用。主要研究内容如下:(1)采用表面印迹技术,以柠檬苦素为模板,修饰的SiO2纳米颗粒作为支撑材料,制备MIPs作为吸附剂,首次从柠檬汁中除去柠檬苦素。实验结果表明,与NIPs(8.12 mg/g)相比,MIPs具有更高的吸附量(27.72 mg/g)和快速吸附能力(60 min);选择性实验表明,MIPs对柠檬苦素有较好的识别能力,对诺米林和黄柏酮的选择性因子分别为2.75和1.83。最后,MIPs成功地从柠檬汁中选择性的除去了柠檬苦素,根据HPLC结果,MIPs几乎分离出柠檬汁中所有的柠檬苦素。(2)采用表面印迹技术,以淫羊藿苷为模板制备了高效、灵敏的双功能单体磁性MMIPs,并成功用于富集淫羊藿总黄酮在大鼠睾丸和骨头中的代谢产物。壳聚糖和甲基丙烯酸作为双功能单体,其中壳聚糖具有生物相容性,甲基丙烯酸能提供更多的氢键供体。MMIPs具有较强的吸附能力(7.60 mg/g)、较快的传质速率(60min)和良好的选择性识别能力。MMIPs对木犀草素和大黄素的选择性因子分别为2.63和2.12。在最优条件下,方法的检出限和定量限分别为0.0025μg/mL和0.05μg/mL。将MMIPs直接注入雄鼠睾丸中特异性富集体内淫羊藿总黄酮的代谢物,并用于体外从骨头中提取代谢物。实验结果表明,MMIPs与UPLC-Q-TOF-MS结合,在睾丸中成功鉴定出28种化合物,骨头中成功鉴定出19种化合物,其中包括27种新化合物,该研究为从复杂样品中富集代谢产物提供了可靠的方案。(3)采用本体聚合法,以槲皮素和五味子乙素为双模版,低共熔溶剂为功能单体,制备了绿色安全、无毒无害的DMIPs,并将其用于从赶黄草-五味子粗提物中同时富集槲皮素和五味子乙素。研究结果表明,DMIPs能在80 min快速达到吸附平衡,对槲皮素和五味子乙素的最大吸附量分别为23.58 mg/g和41.64 mg/g。选择性实验表明DMIPs对槲皮素和五味子乙素有较好的选择识别能力,对其结构类似物木犀草素、淫羊藿苷、五味子醇甲和五味子甲素的选择性因子分别为1.71、1.83、3.95和2.17。利用DMIPs成功富集到五味子和赶黄草粗提物中的槲皮素和五味子乙素。此外,将富集槲皮素和五味子乙素的DMIPs灌胃小鼠,在不同时间点取血,成功检测到血液样品中槲皮素和五味子乙素,且他们的药代动力学与文献报导结果类似。本章实验证明,分子印迹材料可用于从复杂基质中特异性分离纯化目标分子,同时富集目标分子后的MIPs可进一步用到其他方面。
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