超氧化物歧化酶广泛存在于各种生物体内。目前已从细菌、藻类、霉菌、高等植物、昆虫、鱼类、鸟类和哺乳动物等各种生物体内分离得到，并通过多种方法应用到实际中，如化妆品、医药、食品、人及动植物许多疾病的检测方面。但是大多是从动物体内提取，因动物体内SOD含量多，活性高；而植物体内相对含量少，活性低。许多报道芦荟具有消炎、杀毒等多方面的功效，芦荟已作为药材、化妆品，保健食品在市场销售。可是至目前为止未见到从芦荟中分离纯化SOD的报道。基于以上三方面的原因，本文探讨了从芦荟中分离纯化SOD的方法并对其基本性质进行了研究。一方面为了更彻底地了解芦荟中的成分；另一方面为芦荟中的SOD的应用、基因克隆奠定基础。现将研究结果报告如下： 1．分离纯化 将芦荟的叶子洗净、擦干，加入Tris-HCl缓冲液进行组织捣碎提取SOD，高速离心；将提取液用丙酮使SOD沉淀、静止，低速离心；将沉淀用蒸馏水充分溶解，50℃水浴中加热15min，离心除去部分杂蛋白，获得粗酶液。将粗酶液过DEAE-琼脂糖柱层析，得三个活力峰，分别收集、透析、干燥浓缩后；再上Sephacryl S-200凝胶柱层析，按与DEAE-琼脂糖柱层析后同样的方法收集处理。将第二次得到的干燥的SOD进行同工酶电泳及活性染色、等电点聚焦电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。可知SOD-Ⅰ，SOD-Ⅱ，SOD-Ⅲ三种同工酶均得到完全分离纯化。SOD-Ⅰ纯化倍数为60.1，活性回收率为3.4％；SOD-Ⅱ纯化倍数为153，活性回收率为5.6％；SOD-Ⅲ纯化倍数为84.6，活性回收率为4.2％。由此可知利用此法SOD-Ⅱ纯化倍数及活性回收率在三个同工酶中最高。 2．性质研究 Cu，Zn-SOD对氰化物和过氧化氢均敏感。Mn-SOD对氰化物和过氧化氢均不 芦苔超氧化物歧化酶的分离纯化与性质研究敏感。而FnSOD对氰化物不敏感，对过氧化氢敏感。1。1几＊＊N对芦苔中s0D活力几乎无影响；srnmol／L HZO。使芦苔中SOD活力完全失活。可以判定该酶是铁超氧化物歧化酶 凝胶过滤法测得SOD－I的分子量约为46 000 D，SOD－11的分子量约为35000 D子量为，SOD－Ill分子量约为 40 000 D。把通过凝胶过滤的 SOD－I、SOD－11、SOD－Ill酶，进行 SDS－聚丙烯酞胺凝胶电泳（SDS－PAGE）测得芦苔中 SOD的亚基分子量分别为：SOD－I约为23000D、SOD《约为17000D、SOD－Ill约为19000D。这两种结果进一步证明芦苔中的三条 SOD同工酶均为 Fe－SOD；并且均由两个相同的亚基组成。 等电点聚焦电泳进一步证实芦苔中的三条同工酶完全分离纯化，并测得它们的等电点分别为：8．9、7石、7．35。 修饰齐uPMSF，DTT，PCMB，NBS，BrAc，IAc，SUAN，TNBS不适合检狈uSOD酶的功能基团。