【摘 要】
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本文通过构建jadA的同框缺失突变株并以此筛选突变株的积累产物，证明rabelomycin是代谢中间产物的副产物；而UWM6和2,3-dehydro-UWM6是捷达霉素合成代谢的中间产物，可以用作
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本文通过构建jadA的同框缺失突变株并以此筛选突变株的积累产物，证明rabelomycin是代谢中间产物的副产物；而UWM6和2,3-dehydro-UWM6是捷达霉素合成代谢的中间产物，可以用作底物研究捷达霉素的post-PKSs修饰过程。在链霉菌StreptomyceslividansTK24中共表达jadFGH得到LC2014。以UWM6或2,3-dehydro-UWM6为底物的LC2014体内和体外转化实验均表明当JadFGH存在时，可以将UWM6或2,3-dehydro-UWM6转化为捷达霉素A。证明JadFGH共同存在，可以完成捷达霉素post-PKSs修饰过程的五步反应：2,3-脱水、4a,12b-脱水反应、C-12位加氧、B环的氧化开环和氨基酸的插入。根据以上推理和实验证据，提出了更详尽的jadomycin合成途径，及功能和基因的对应关系。
在大肠杆菌中分别融合表达JadF、JadG和JadH，并利用亲和柱层析的方法纯化蛋白，切掉亲和标签后得到了不含标签的JadF和JadH。体外转化实验证明：JadF单独作用时，不能催化2,3-脱水反应；JadH可以催化4a,12b-脱水和C-12位加氧两个反应。JadF的脱水功能可能需要其他蛋白(如：JadG)的参与。JadH则被证明为FAD-依赖型的氧化/脱水双功能酶。
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