论文部分内容阅读
花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim.)是我国一种非常重要的经济作物,属于芸香科花椒属的多年生落叶灌木或小乔木,其果皮红色至紫红色,密生疣状突起的腺体。是我国所特有的一种香辛料,最主要的用途是用于多种食品的烹调加工调味之中,具有赋香、着色、掩盖异味、防腐、保健、增加食欲等作用。同时也是重要的荒山绿化和水土保持生态型经济林树种。因此,在我国农业种植结构调整政策影响下,花椒的种植也得到了大力的推广与发展。但是,影响花椒产业迅速发展的病虫害问题也逐渐的突出,尤其是花椒枝干病害带来的危害尤为严重。为了解决这一问题,本文对陕西、甘肃两省等花椒主要产区的疫霉病的病原菌进行了形态学鉴定与分子系统学分析并初步对其拮抗菌作了筛选,得到以下结果:1.对陕西、甘肃省等地的花椒疫霉病进行病斑采集,从各花椒品种枝干基部病斑上分离得出9株疫霉菌。生物学性状试验表明,诸疫霉菌系在PDA、OA、V8、CA各种培养基上均可产生白色绒毛状至短棉絮状菌落,并以在OA培养基上生长速率最快,其次是V8培养基,以V8培养基上的菌落最稠密,PDA次之,OA培养基上菌落多稀疏。根据培养基菌丝体、孢子囊和有性繁殖体形态特征将9个花椒疫霉菌菌系分为两类,采自陕西凤县和宝鸡的Pfs4、 Pfs5、Pfs3和Pbjt4菌系孢子囊长宽比较小,藏卵器大量产生,归为一类。采自甘肃陇南的Pwbs3、Pwmc、Pwqh、Pcxs、Pwbs25菌系孢子囊长宽比较大,藏卵器产生较少,归为一类。2.致病性测定结果显示,各菌系致病性存在明显差异。Pcxs、Pwbs2等陇南菌系致病性总体较强,Pbjt、Pfs5等宝鸡凤县菌系致病性较弱。3.根据ITS和β-tubulin基因序列对供试9个疫霉菌菌系进行分子系统发育分析,供试9个疫霉菌菌系被分为两个类群,陕西凤县采集的4株菌系与苎麻疫霉(Phytophthora boehmeriae)聚为一类、甘肃陇南采集的5株与多寄主疫霉(Phytophthoramultivora)聚为一类。综合形态学、分子系统检测及致病性测定,结果一致,确定出陕西地区采集的4株为苎麻疫霉(Phytophthora boehmeriae)、甘肃地区采集的5株为多寄主疫霉(Phytophthora multivora)。4.以花椒疫霉菌系Pfs3、Pwbs2为指示菌,采用生长速率法从土壤中筛选出一株有拮抗效果的放线菌zy-1,并利用该放线菌发酵液进行抑制菌丝生长和抑制孢子萌发试验,4d时对菌丝抑制率分别为36.4%和31.3%,对孢子萌发抑制率分别为44.2%和41.1%。通过zy-1菌株形态及培养特征,初步鉴定为链霉菌(Streptomyces sp.)。