不同品系棉铃虫对转Bt基因棉的选择性及嗅觉相关基因表达谱分析

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棉铃虫(Helicoverpa armigera hiibner)是一种重要的多食致灾性害虫,可在棉田肆虐危害造成棉花严重减产。随着我国转基因抗虫棉推广年限的延长,转基因棉田已成为棉铃虫重要的诱杀陷阱。因此,深入研究棉铃虫对转基因棉的选择性并同时监测棉铃虫对转基因棉的抗性变化显得尤为重要。本文着重研究不同种群棉铃虫对转Bt基因棉的产卵选择趋性,幼虫、成虫对转Bt基因棉的选择性,同时对不同品系棉铃虫嗅觉相关基因的表达量进行了测定,并探讨了转基因棉对田间虫源和室内连续多代饲养的敏感种群的抗虫性,期以为转Bt基因棉花的抗性利用与棉铃虫的综合治理提供科学依据。全文主要研究结果如下:1、采用田间笼罩接蛾法,调查敏感品系和田间品系棉铃虫成虫的产卵选择性。结果表明:不同处理棉花长势各指标较为一致,但棉铃虫田间虫源在转Bt基因棉上的产卵量显著高于常规棉,而棉铃虫室内敏感虫源在转Bt基因棉和常规棉上的产卵量差异不显著。2、利用培养皿叶盘法测定了田间品系、田间品系F12、室内敏感品系等3个种群棉铃虫1龄和3龄幼虫对中棉30和中棉16,中棉41和中棉23,GK22和泗棉3号这3组气味源的选择性。结果表明:3个棉铃虫种群的1龄幼虫大部分趋向于选择非转基因棉;而3龄幼虫只有敏感种群趋向于选择非转基因棉,另外两个棉铃虫种群对Bt、非Bt棉的选择性趋势不明显。3、采用“Y”型嗅觉仪的方法,研究了敏感品系、田间品系F12和田间品系棉铃虫成虫对中棉16与中棉30,中棉23与中棉41,泗棉3号与GK22,石远321与SGK321四组气味源的选择趋性。结果表明:除2013年采集的田间品系棉铃虫未交配的雌蛾趋向选择非Bt棉外;2012年采集的田间品系棉铃虫,2013年采集的田间品系棉铃虫交配的雌、雄蛾及室内人工饲养多代棉铃虫的未交配的雄蛾、雌蛾及交配后的雄蛾均趋向选择转Bt棉;其他处理棉铃虫对转Bt基因棉和非转基因棉的选择性差异不显著。4、采用室内生物测定法,利用不同种群的棉铃虫分别测定了苗期和现蕾期转Bt基因棉花品种的抗虫性。苗期和现蕾期GK22、中棉30、中棉41的Bt毒蛋白表达量均在600.00ng/g以上。同一转基因棉对不同棉铃虫种群的抗虫性高度一致,表明本研究中涉及的棉铃虫田间种群对转Bt基因棉仍较为敏感,并未产生抗性。5、对不同品系棉铃虫成虫嗅觉基因CSP、OBP和PBP的含量进行了测定,结果表明:与敏感种群相比较,除未交配的雌虫CSP6基因的表达量下调以外,田间种群的CSP5、CSP6基因表达量均出现不同程度的上调;2012年田间种群人工饲养12代后的OBP2、OBP6基因表达量与敏感种群无显著差异,20122及2013年新采集的田间种群的OBP2基因表达量与敏感种群相比差异达显著或极显著;除2012年的田间种群外,其他田间种群的OBP6基因表达量与敏感种群差异不显著;2012、2013年采集的田间棉铃虫种群PBP1、PBP2、PBP3基因的表达量均显著高于敏感种群,而2012年采集的棉铃虫种群室内人工饲养12代后,PBP1、PBP2、PBP3基因表达量均显著下降,并接近于敏感种群。综合上述研究结果,不同抗性品系棉铃虫的成虫产卵、幼虫取食的选择性及成虫嗅觉基因CSP、OBP和PBP的表达量有所差异,但田间种群对转Bt基因棉仍较为敏感,并未产生抗性。
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