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反复自然流产(Recurrent Miscarriage,RM)是指两次或多次发生临床确诊的宫内妊娠失败,其发生率2%至5%。自然流产,特别是反复自然流产是临床中常见而又棘手的问题。迄今为止,反复自然流产对医生和患者而言仍是一个挑战。RM的病因复杂,全面诊断困难。常见的病因包括:胚胎染色体异常、内分泌疾病、生殖系统解剖异常、免疫等因素;到目前为止,仍有将近一半以上的RM病因还不清楚。越来越多的证据表明,表观遗传学机制参与早期胚胎发生和胎儿的宫内生长发育,并影响妊娠结局;表观遗传模式的缺陷可能有助于RM的发生。EZH2是多梳蛋白复合物(Polycomb Group,PcG)中的酶活性成分,能够催化靶基因启动子区H3K27me3的形成,在转录水平上抑制基因的表达。EZH2常与其它表观遗传机制如DNA甲基化、lncRNA、microRNA等协同作用,促进异染色质的形成从而发挥基因沉默的功能。研究表明EZH2在哺乳动物的配子形成、胚胎着床与发育、器官分化以及某些恶性肿瘤的转移中发挥重要作用。本论文我们研究了组蛋白修饰酶EZH2在RM发病机制中的作用。与对照组绒毛(临床上因非医学原因行人工流产的早孕期绒毛组织)相比,RM患者的绒毛组织中EZH2的表达在mRNA水平和蛋白水平均显著下降。免疫组织化学实验表明在RM绒毛组织中,细胞滋养细胞中EZH2显著降低。接着,我们采用JAR作为细胞滋养细胞的体外模型,通过Transwell实验,发现EZH2基因敲低或酶失活(EZH2小分子抑制剂)能够显著降低滋养细胞的侵袭力。在机制上,我们发现EZH2可以直接促进上皮间质转变(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)过程。此外,我们还发现EZH2通过转录抑制抑癌基因CDX1的表达,而间接促进EMT过程。ChIP-qPCR实验表明EZH2直接结合CDX1启动子区,并催化H3K27形成H3K27me3,在转录水平上抑制CDX1的表达。双荧光素酶实验进一步证实:EZH2的过表达能显著抑制CDX1的启动子活性。综上所述,RM的发生与EZH2的表达下降导致滋养细胞的侵袭功能受损有关;EZH2调控滋养细胞侵袭功能的作用机制,既包括直接促进EMT,也包括转录抑制CDX1的表达从而间接促进EMT过程。此外,孕激素可激活ERK1/2信号通路,而不是PI3K/AKT信号通路,促进EZH2分子的表达。临床上孕激素广泛用于预防和治疗病理性妊娠,如RM,而表观分子EZH2的表达受到其调节,提示表观遗传机制可以作为一种潜在的RM治疗方向。