CDC7、MCM4在大肠癌中的表达及其相关性研究

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大肠癌(colorectal cancer,CRC)是严重危害人类健康的消化道恶性肿瘤,在我国发病率及死亡率均很高,CRC是由遗传因素和环境因素共同相互作用形成的,其与细胞增殖和信号转导等密切相关。CRC和多数的恶性肿瘤相同,其发生发展以细胞周期的紊乱导致细胞不断增殖为基础,CDC7和MCM4是与细胞周期有关的两种蛋白,它们共同作用于细胞DNA复制的起始时期。本实验通过检测CDC7、MCM4在大肠癌组织及大肠正常黏膜组织中的表达,分析两者与大肠癌生物学行为(Duke’s分期、浸润深度、分化程度及淋巴结转移)的关系及两者之间的相关性,及二者在大肠癌发生、发展中的作用,对大肠癌患者临床治疗及预后的评估提供理论依据,同时二者有望为临床治疗大肠癌提供新的靶点。目的:通过免疫组化SP法检测CDC7、MCM4蛋白的表达,RT-PCR技术检测CDC7、MCM4的mRNA分别在大肠癌组织及大肠正常黏膜组织中的表达情况,分析CDC7、MCM4实验得出的相关数据,并研究两者在大肠癌中的表达情况及分析两者之间的相关性。方法:收集2014年1月至2015年1月承德市附属医院、承德市中心医院手术切除并经病理诊断为大肠癌的组织标本80例,大肠正常黏膜组织标本30例。应用免疫组化SP法检测CDC7、MCM4蛋白,分析二者在大肠癌组织及大肠正常黏膜组织中的表达情况;采用RT-PCR技术检测大肠癌组织及大肠正常黏膜组织中CDC7、MCM4的mRNA表达水平,结合临床病理资料,应用统计软件分析所得实验数据。结果:1免疫组化实验结果1.1 CDC7蛋白、MCM4蛋白在大肠癌组织中的表达均高于在大肠正常黏膜组织中的表达,差异有统计学意义(p<0.05)。1.2cdc7蛋白在大肠癌低、未分化组的表达显著高于高、中分化组;duke’s分期中c期组的cdc7蛋白表达显著高于b期组(p<0.05),duke’s分期中b期组的cdc7蛋白表达显著高于a期组(p<0.05);淋巴结转移组的cdc7蛋白表达显著高于淋巴结未转移组(p<0.05);浸润深度>肌层组的cdc7蛋白表达显著高于≤肌层组(p<0.05)。1.3mcm4蛋白在大肠癌低、未分化组的表达显著高于高、中分化组;duke’s分期中c期组的mcm4蛋白表达显著高于b期组(p<0.05),duke’s分期中b期组的mcm4蛋白表达显著高于a期组(p<0.05);有淋巴结转移组的mcm4蛋白表达显著高于淋巴结未转移组(p<0.05);浸润深度>肌层组的mcm4蛋白表达显著高于≤肌层组(p<0.05)。大肠癌组织中cdc7蛋白、mcm4蛋白的表达均与性别、年龄大小无关,差异无统计学意义(p>0.05)。2rt-pcr实验结果2.1cdc7的mrna、mcm4的mrna在大肠癌中的表达均高于在大肠正常黏膜组织中的表达,差异均有统计学意义(p<0.05)。2.2cdc7的mrna在大肠癌低、未分化组的表达显著高于高、中分化组;duke’s分期中c期组cdc7的mrna表达显著高于b期组(p<0.05),duke’s分期中b期组cdc7的mrna表达显著高于a期组(p<0.05);淋巴结转移组cdc7的mrna表达显著高于淋巴结未转移组(p<0.05);浸润深度>肌层组cdc7的mrna表达显著高于≤肌层组(p<0.05)。2.3mcm4的mrna在大肠癌低、未分化组的表达显著高于高、中分化组;duke’s分期中c期组的mcm4的mrna表达显著高于b期组(p<0.05),duke’s分期中b期组的mcm4的mrna表达显著高于a期组(p<0.05);淋巴结转移组的mcm4的mrna表达显著高于淋巴结未转移组(p<0.05);浸润深度>肌层组的mcm4的mrna表达显著高于≤肌层组组(p<0.05)。大肠癌组织中cdc7的mrna、mcm4的mrna表达均与性别、年龄大小无关,差异无统计学意义(p>0.05)。3cdc7和mcm4之间的相关性分析3.1 CDC7蛋白、MCM4蛋白的相关系数:rs=0.368(P<0.05);3.2 CDC7的mRNA、MCM4的mRNA的相关系数:r=0.642(P<0.05)。结论:1 CDC7蛋白的阳性表达、MCM4蛋白的阳性表达在大肠癌组织和大肠正常黏膜组织中,差异均具有显著性,且均与大肠癌组织的Duke’s分期、浸润深度、分化程度及淋巴结转移有关,且与性别和年龄大小无关。2 CDC7的mRNA、MCM4的mRNA在大肠癌组织和大肠正常黏膜组织中相对表达量的均具有显著性的差异,且均与大肠癌组织的Duke’s分期、浸润深度、分化程度及淋巴结转移有关,而与性别和年龄大小无关。3大肠癌组织中CDC7蛋白和MCM4蛋白呈正相关关系;大肠癌组织中CDC7的mRNA和MCM4的mRNA呈正相关关系;CDC7和MCM4在大肠癌的发生、发展中呈正协同作用。
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