论文部分内容阅读
目的:探讨银杏叶提取物(EGb761)对顺铂(CDDP)和足叶乙甙(VP-16)诱导的胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:体外培养胃癌SGC-7901细胞,采用EGb761、CDDP、VP-16、EGb761+CDDP或EGb761+VP-16处理人胃癌细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞的凋亡,化学比色法检测细胞中过氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性以及丙二醛(MDA)的含量,免疫印迹法检测细胞中ERK1/2、p-ERK1/2和NF-κBp65蛋白的表达,采用免疫细胞化学法检测细胞中p-ERK1/2和NF-κBp65的表达。结果:与单用CDDP或VP-16组比较,合用EGb761组细胞的增殖活性明显降低,同时细胞的凋亡水平显著升高。而且,合用EGb761能显著提高SGC-7901细胞中SOD、GSH-PX和CAT的活性[CDDP组vsCDDP+EGb761组,SOD活性:17.36U/mgprot±3.13U/mgprotvs27.35U/mgprot±4.84U/mgprot,CAT的活性:2.56U/mgprot±0.37U/mgprotvs3.91U/mgprot±0.59U/mgprot,GSH-PX的活性:23.98μmol(/min·mgprot)±3.35μmol(/min·mgprot)vs35.78μmol(/min·mgprot)±6.56μmol(/min·mgprot);VP-16组vsVP-16+EGb761组,SOD活性:16.23U/mgprot±2.79U/mgprotvs26.40U/mgprot±4.27U/mgprot,CAT的活性:2.61U/mgprot±0.38U/mgprotvs3.84U/mgprot±0.62U/mgprot,GSH-PX的活性:22.87μmol/(min·mgprot)±4.34μmol/(min·mgprot)vs35.33μmol/(min·mgprot)±5.90μmol/(min·mgprot),P<0.05];同时MDA的含量明显降低(CDDP组vsCDDP+EGb761组,MDA含量:2.27nmol/mgprot±0.39nmol/mgprotvs1.39nmol/mgprot±0.25nmol/mgprot;VP-16组vsVP-16+EGb761组,MDA含量:2.33nmol/mgprot±0.45nmol/mgprotvs1.40nmol/mgprot±0.23nmol/mgprot,P<0.05)。此外,免疫印迹结果显示EGb761能明显抑制由CDDP和VP-16诱导的ERK1/2、p-ERK1/2和NF-κBp65的表达(CDDP组vsCDDP+EGb761组,ERK1/2蛋白表达:0.726±0.125vs0.476±0.083,p-ERK1/2蛋白表达:0.520±0.087vs0.276±0.049,NF-κBp65蛋白表达:0.524±0.091vs0.274±0.045;VP-16组vsVP-16+EGb761组,ERK1/2蛋白表达:0.734±0.126vs0.488±0.086,p-ERK1/2蛋白表达:0.486±0.091vs0.298±0.053,NF-κBp65蛋白表达:0.458±0.086vs0.256±0.042,P<0.05)。免疫细胞化学结果也表明EGb761能明显抑制由CDDP和VP-16诱导的p-ERK1/2和NF-κBp65的表达(CDDP组vsCDDP+EGb761组,p-ERK1/2蛋白表达平均光密度:0.61±0.11vs0.32±0.05,NF-κBp65蛋白表达平均光密度0.58±0.09vs0.35±0.06;VP-16组vsVP-16+EGb761组,p-ERK1/2蛋白表达平均光密度:0.68±0.13vs0.43±0.07,NF-κBp65蛋白表达平均光密度0.72±0.13vs0.45±0.07,P<0.05)。结论:EGb761可增强顺铂和足叶乙甙对胃癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用从而提高化疗敏感性。EGb761可能是通过增强细胞抗氧化能力,下调ERK和NF-κB通路而提高胃癌细胞化疗敏感性。