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背景与目的：消化道肿瘤是我国常见的恶性肿瘤之一，又以胃癌和大肠癌最为常见。作为多基因相关肿瘤，目前认为多种基因在不同阶段参与了胃癌和大肠癌的发生过程，但其发病机制仍不明确。为维持遗传的稳定，保持DNA复制的真实性，无论是细菌还是人类都有着一套完整的DNA修复系统，修复受损或突变的DNA。其中修复DNA复制中发生的碱基错配的系统称为错配修复系统，可避免复制错误的产生与积累。参与组成这一系统的主要基因称为错配修复基因(mismatch repair gene，MMR)。1993年，MMR中hMSH2基因作为伴有基因不稳定性的遗传性肿瘤—遗传性非息肉性大肠癌(hereditary non-polyposis colorectal cancer，HNPCC)的相关基因首先被分离确定，此后又陆续分离了与MutS同源的hMSH3和hMSH6，与MutL同源的hMLH1、hMLH3、hPMS1和hPMS2等错配修复基因。研究证明HNPCC患者中有60％、30％的发病缘于hMSH2和hMLH1基因功能缺陷。错配修复基因功能缺陷使复制错误得不到修正，突变累积，进而导致基因组不稳，细胞失控，肿瘤发生。在此后的研究中人们逐渐发现MMR基因不仅与HNPCC这样的遗传性肿瘤相关，与散发性肿瘤也有密切的联系，特别是胃肠道肿瘤。MMR基因在散发性消化道肿瘤中究竟扮演着什么样的角色，与肿瘤发生和发展有着怎样的关系目前倍受关注。本研究通过对散发性胃癌和大肠癌组织中hMSH2和hMLH1基因的蛋白表达、突变和甲基化状态的系统研究，探讨MMR基因与消化道肿瘤发生及演进的关系。 材料与方法:胃癌标本76例取自2002一2003年大连医科大学附属第一医院胃镜活检病例，经病理诊断证实为胃腺癌，每例包括癌组织及其对应的癌旁粘膜组织，并通过快速尿素酶法检测胃粘摸组织中幽门螺杆菌感染情况，采用免疫组化方法检测胃癌及其癌旁粘膜组织句功SHZ和扣域LHI蛋白表达情况。大肠癌标本45例取自2001一2002年大连医科大学附属第二医院外科手术病例，经病理诊断为大肠腺癌。免疫印记法定量检测其中37例hMSHZ和h加llJHI蛋白表达情况，并分析其与临床病理间的联系。采用CE一CR-SSCP方法结合基因序列分析检测45例大肠癌组织hMSHZ基因第5、7、12号外显子和扣功LHI基因第3、8、12、13和16号外显子，并采用限制性内切酶结合PCR技术分析其中37例h州[L Hl基因启动子区域的甲基化状况。实验数据采用卡方检验、t检验和单因素方差分析统计学方法在 SPSS软件上进行分析。 结果: 一、11MSHZ和h加几Hl蛋白在胃癌中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系 1.hMSHZ在胃癌组织中的表达率(67.1%，51/76)显著高于癌旁粘膜上皮(35.5%，27/76)(P<0.05)。在低分化腺癌的表达率 (81.1%，30/37)显著高于高中分化腺癌(54.5%，12/22)和勃液癌 (52.9%，9/17)(P<0 .05);高中分化腺癌与戮液癌间无显著性差异 (P>0 .05)。 2.hN比Hl在癌组织中的表达率(81.6%，62/76)低于癌旁粘膜上皮(90.8%，69/76)的表达率，但不具有显著性(P>0.05);癌组织中高中分化腺癌和低分化腺癌的表达率显著高于豁液癌(P<0.05)，高中分化腺癌和低分化腺癌无显著性差异(P>0.05)。 3.HP感染组hMSHZ蛋白的阳性表达率在胃癌组织中显著低于非感染组(P(0.05);在癌旁粘膜组织中的比较也呈现了相同的趋势，但无显著差异(P>0.05)。HP感染组h州压Hl蛋白的阳性表达率在胃癌组织和癌旁粘膜上皮中均低于非感染组，但均无显著差异(P>0二05)。 二、扣功LHI和hMSHZ蛋白表达与散发性大肠癌临床病理关系 1.大肠癌37例hN几HI蛋白表达mass值平均为1 5 .56土12.29，最高值47.83，最低值0.92，中位值为13.80。h加几Hl蛋白在70及70岁以上患者中的表达水平显著低于70岁以下患者(P<0.05);在不伴有转移病例中的表达显著低于伴有转移病例(P<0.05);在右半结肠中的表达显著低于发生于除直肠外的其他部位的肿瘤(P<0.05);高、中、低三种分化肿瘤中的表达水平依次降低，两两比较具有显著性差异(P<0 .05)。 2.37例大肠癌hMSHZ蛋白表达mass值平均为12.02士9.91，最高值37.23，最低值1 .34，中位值为9.06，其表达水平与患者性别、年龄、肿瘤的部位、分化及转移间无明显相关关系(P>0.05)。 三、散发性大肠癌hMSHZ和hMLHI的突变情况 1.45例散发性大肠癌组织hMSHZ基因第5、7、12号外显子未见突变; 2.45例散发性大肠癌组织11MLHI基因第3、8、13和16号外显子未见突变，第12号外显子发现3例第384位密码子的错义突变 (G竹一GAT，Val384Asp)，突变率为6.67%。3例突变病例hMLHI蛋白表达水平居37例大肠癌蛋白表达水平的中位数以上，且肿瘤部位均位于左半结肠以下。 四、hN几Hl启动子甲基化情况的研究 1.在37例大肠癌组织发现6例启动子区域甲基化，占16.22% (6/ 37) 2.甲基化病例蛋白表达mass值平均为3 .11士1 .68，显著低于无甲基化发生病例(17.96士12.20)(P<0.05)。 3.甲基化与患者年龄、性别、分化、转移及肿瘤部位间无明显相关关系。 结论: 一、hNISHZ蛋白表达异常与胃癌发生相关，其高表达可能是胃癌发生.的标志;HP感染影响hMSHZ和hN比Hl基