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亚洲小车蝗Oedaleus asiaticus Bei-Bienko是我国北方草原和农牧交错区主要的害虫之一。为了从分子水平评价内蒙古地区亚洲小车蝗种群的遗传多样性和种群间遗传分化,本文首先对其样本保存方法进行了研究,对液氮速冻处理后冷冻保存、直接冷冻保存、100%乙醇保存和干制的亚洲小车蝗样本进行基因组DNA提取,对比四种不同样本保存方法对获得的DNA的影响;然后分别采用8对SSR引物、288bp的核糖体DNA部分序列和7条ISSR引物对内蒙古15个地点的亚洲小车蝗种群进行遗传多样性进行了分析。结果表明:1.蝗虫样本保存方法的比较在低温胁迫下,蝗虫细胞死亡过程中伴随着DNA降解的情况发生。为了能够在蝗虫分子系统学研究当中获得高质量的基因组DNA用于实验研究,选用了一种方便、快捷、安全、有效的蝗虫样本保存方法——液氮速冻样本处理法。为进一步进行蝗虫分子生物学的研究提供了必要的基础保障。2.内蒙古亚洲小车蝗不同地理种群遗传多样性的SSR和ISSR分析(1)从前人对蝗虫的SSR研究报道中,筛选出8对多态性好,能对亚洲小车蝗种群遗传多样性的SSR研究提供良好信息的SSR引物(Ata35、Ata52、LmIOZc67、 MwGTD9、MwGTG12、MwGTC12、Ata68、Phr2T),结果表明,8对SSR引物对15个地里亚洲小车蝗种群扩增出的平均等位基因数为8.8750、平均有效等位基因数为7.3312、多态性含量均值为0.5601。说明8个位点均为高度多态性位点,都能为遗传多样性的分析提供充足信息。(2)从加拿大哥伦比亚大学设计并公布的100条通用ISSR引物中筛选出适用于亚洲小车蝗种群,扩增条带色彩明亮、清晰可辨且可重复性好的7条ISSR引物(807、810、811、812、823、880、899),7条ISSR引物共扩增出85个色彩明亮、清晰可辨的条带,每条引物扩增出的条带数为9-15,平均为12.1429,所有条带均为多态性条带,7条ISSR引物的平均多态信息含量为0.8466,且均大于0.5。结果说明,7条ISSR引物都能为本研究提供充足的数据信息。(3)15个亚洲小车蝗种群之间存在中等程度的基因交流(1<Nm<4),且有较大的遗传多样性和遗传分化。15个种群的mantel检测结果表明,种群间遗传距离与地理距离呈极显著的相关关系。我们认为地理距离、地形的差异等地理障碍是限制其种群间基因交流,导致遗传分化较高的主要原因。3.亚洲小车蝗rDNA部分序列分析1)本研究测定的亚洲小车蝗rDNA的288bp序列中G+C含量高于A+T含量,与前人研究结果对比得出,不同物种之间的rDNA序列碱基组成存在差异且同一物种不同基因的碱基组成同样存在差异。2) rDNA序列由于所涵盖的信息量小,难以实际的反应遗传多样性的全部规律,所以我们认为rDNA序列不适合用于蝗虫种下遗传分化的研究,这与前人的研究结果也是一致的。研究结果从分子水平探索了不同地区亚洲小车蝗种群间的内在联系,为制定亚洲小车蝗的综合治理策略提供了分子生物学的基础资料。