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肝移植（liver transplantation，LTx）已成为各种终末期肝脏疾病的有效治疗方法。目前，其长期存活率已接近70％，但仍有5％～15％的患者，术后可出现原发性移植肝无功能（primary nonfunction，PNF）。研究发现这与移植肝冷保存及移植后的再灌注损伤密切相关，而肝窦内皮细胞（sinusoidal endothelial cell，SEC）的损害直接导致了移植肝冷保存再灌注的损伤，是引起PNF的主要原因。 在肝脏移植过程中，供肝常需经历一定时间的冷保存，若能在此过程中对供肝进行有效的保护，减轻SEC的损伤，对于预防和避免术后PNF的发生，具有重要意义。 药理学研究发现，银杏叶制剂金纳多（Ginaton）能够特异性的去除肝脏缺氧／复氧过程中线粒体产生的超氧化物，从而保护其ATP的合成。金纳多还可以改善热缺血大鼠肝脏的微循环，从而保护肝脏功能。但金纳多对肝移植过程中的冷保存及移植后的再灌注损伤是否具有防护作用，尚有待研究。 目的 把一定浓度的金纳多添加到Euro-collins液中，通过大鼠同种异体原位肝移植模型，观察其能否对不同冷保存时间下肝细胞及SEC的损伤进行有效保护。 方法 Wistar大鼠119只，随机取出7只为正常对照组（N组），另外112只随机分为供体组和受体组，两两配对后再随机分为8组（每组14只大鼠，其中7只为供体，另7只为受体），即实验对照1组（C1组），实验对照2组（C2组），实验对照3组（C3组），实验对照4组（C4组）和实验1组（E1组），实验2郑州大学2003年硕士毕业论文金纳多对大鼠供肝冷保存再灌注中肝窦内皮细胞损伤的防护作用组（EZ组），实验3组（E3组），实验4组（E4组）。其中C，、E，为供肝冷保存3小时组，CZ、E:为供肝冷保存6小时组，C3、E:为供肝冷保存8小时组，C4、E4为供肝冷保存12小时组。正常对照组仅做开腹关腹和游离肝脏，而不行肝脏移植，实验对照组仅用4℃的E盯。一conins液灌注和保存供肝，实验组用含0.2留L金纳多的4℃的E盯。一coilins液灌注和保存供肝。肝移植动物模型的建立参照Kamada及Calne二袖套大鼠原位肝移植的方法。在受体门静脉复流后巧分钟、30分钟和60分钟时，分别从下腔静脉采血约1.2ml。并于门静脉复流后60分钟用锋利刀片快速切取肝脏中叶约1I’nInX IllunX Ilnln。血标本离心后留取血浆或血清，分装保存于一70℃低温冰箱，肝组织按照透射电镜标本要求处理，待测。 检测血浆中内皮素（endothelin，ET）的含量、血清中透明质酸（hya一uronieaeid，HA）的含量和血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，A许）、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase，AS劝的含量。透射电镜观查肝脏肝窦内皮细胞的损伤情况。移植过程中记录受体无肝期及受体手术时间。应用SPSSIO.O统计分析系统，采用重复测量设计的方差分析、单因素方差分析和t检验对全部数据进行统计处理，取以二0.05为显著性检验水准。结果 1.各实验组、实验对照组之间受体无肝期及受体手术时间比较差异无显著性（P>0 .05）。 2.与正常对照组相比，各实验组及实验对照组大鼠门静脉复流后60min时血清ALT、AST水平明显升高（P<0.05）;与实验对照组相比，各实验组大鼠门静脉复流后60min时血清ALT、AST水平明显降低（P<0.05）;随着冷保存时间的延长，各实验对照组之间相比，血清ALT、AST水平按照C，、C:、C3、C4的顺序依次升高（尸<0.05）;各实验组之间相比，血清ALT、AST水平亦按照El、EZ、E3、E4的顺序依次升高，但升高的幅度均较实验对照组低（P<0 .05）。 3.与实验对照组相比，各实验组大鼠门静脉复流后巧min、30min、60min时血清HA、血浆ET水平明显降低（P<0 .05）;各实验对照组之间相比，血清HA、血浆ET水平按照Cl、CZ、C3、C;的顺序依次升高（尸<0 .05）;各实验组之间相比，血清HA、血浆ET水平亦按照E，、EZ、E3、E4的顺序依次升高，但升高的程度均较实验对照组低（尸<0 .05）。、了郑州大学2003年硕士毕业论文金纳多对大鼠供肝冷保存再灌注中肝窦内皮细胞损伤的防护作用CZ、结论4.与实验对照组相比，各实验组大鼠门静脉复流后60min时SEC的损伤减随着冷保存时间的延长，各实验对照组之间相比，SEC的损伤情况按照C;、C:、C4的顺序依次加重，而实验组SEC的损伤情况均较轻。 1.HA、ET是反映肝脏冷保存再灌注过程中SEC损伤的良好指标。检测肝移植术后队、ET含量的变化，有助于提示早期肝脏功能的变化。 2.在一定的时间范围内，SEC的损伤随着冷保存时间的延长而加重。 3.通过在肝脏冷保存液中添加一定浓度（0 .29/L）的金纳多的方法，能够有效地减轻肝脏冷保存再灌注中SEC的损伤，改善供肝术后功能。