二硝托胺是一种有效的硝基酰胺类抗球虫药，在禽类生产中应用十分广泛。然而，长期连续不规范用药会使药物以原形药物或代谢产物的形式在禽类组织中累积，造成禽组织中兽药残留。长期食用含有二硝托胺及其代谢产物的动物食品及其制品，兽药会在人体中累积，对人类健康造成威胁。目前，关于二硝托胺及其代谢产物（3-氨基-5-硝基邻甲苯酰胺，3-ANOT）在家禽组织中的残留确证分析方法主要为液相色谱-串联质谱法，而用气相色谱-串联质谱仪器分析方法对禽组织中二硝托胺及其代谢产物残留检测的研究还未见报道。本研究以京海黄鸡为试验素材，利用加速溶剂萃取和固相萃取技术，建立了鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮肤+脂肪及鸡蛋中二硝托胺及其代谢产物残留气相色谱-串联质谱确证分析方法(GC-MS/MS)，为动物源性食品中二硝托胺及其代谢产物残留检测标准的制定提供科学依据，为残留监控提供新的技术手段。本试验主要研究结果如下:　　1.首次分别建立和优化了采用加速溶剂萃取仪(ASE350)从鸡组织（肌肉、肝脏、肾脏、皮肤+脂肪）和鸡蛋中同时提取二硝托胺及其代谢产物残留的方法。乙腈作为提取溶剂，样品与硅藻土研磨混匀装填入萃取池，80℃、1500 psi条件下，在线去脂（正己烷作为除脂剂）与二硝托胺及其代谢产物萃取（乙腈作为萃取剂）连续进行。当二硝托胺及其代谢产物添加水平分别为定量限(LOQ)、0.5MRL（最高残留限量）、1MRL、2MRL时，鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮肤+脂肪样品中二硝托胺及其代谢产物的平均回收率均在81.96％-94.31％之间，相对标准偏差均在1.72％-5.37％之间;鸡蛋清、蛋黄和全蛋样品中二硝托胺及其代谢产物的平均回收率均在82.74％-87.49％之间，相对标准偏差均在1.73％-4.63％之间。该提取方法节省溶剂、样品基质影响小、萃取效率高、回收率高、方便、快速和全自动。　　2.首次分别建立和优化了鸡组织（肌肉、肝脏、肾脏、皮肤+脂肪）和鸡蛋中同时检测二硝托胺及其代谢产物残留的气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)确证检测方法。采用 EI模式，全扫描（SCAN）定性，Auto SRM结合外标法定量，在空白肌肉、肾脏、皮肤+脂肪、蛋清中添加二硝托胺及其代谢产物LOQ-200.0μg/kg浓度范围内，定量离子对的色谱峰面积与其浓度呈线性相关，且线性关系良好，决定系数(R2)均高于0.9993;在空白肝脏中添加二硝托胺及其代谢产物LOQ-1600.0μg/kg浓度范围内，定量离子对的色谱峰面积与其浓度呈线性相关，且线性关系良好，决定系数(R2)高于0.9993;在空白蛋黄和全蛋中添加二硝托胺及其代谢产物LOQ-1800.0μg/kg浓度范围内，定量离子对的色谱峰面积与其浓度呈线性相关，且线性关系良好，决定系数(R2)均高于0.9995。精密度测定结果:当二硝托胺及其代谢产物添加水平分别为定量限(LOQ)、0.5MRL（最高残留限量）、1MRL、2MRL时，鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮肤+脂肪样品中二硝托胺及其代谢产物日内相对标准偏差均在1.87％-5.74％之间，日间相对标准偏差均在3.34％-7.36％之间;鸡蛋清、蛋黄和全蛋样品中二硝托胺及其代谢产物日内相对标准偏差均在2.96％-5.21％之间，日间相对标准偏差均在3.94％-6.34％之间。在优化的试验条件下，二硝托胺及其代谢产物在鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮肤+脂肪中的检测限(LOD)在0.8-2.5μg/kg（S/N≥3），LOQ在2.7-8.0μg/kg（S/N≥10）;二硝托胺及其代谢产物在鸡蛋清、蛋黄和全蛋中的LOD在0.8-2.8μg/kg（S/N≥3），LOQ在3.0-10.0μg/kg（S/N≥10）。方法验证参数均满足中国农业部、欧盟和美国FDA兽药残留检测的要求，定量准确、快速、灵敏度高。