海带的生物修复作用及无性繁殖系的建立

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近几年,随着我国点源排污的增加及大规模海水养殖,极大地加剧了近海海域的高度富营养化。赤潮正沿着高频率、大面积、损失重的恶性趋势发展。大面积栽培大型海藻是吸收营养盐物质、减轻富营养化的有效途径之一。本文研究了一、海带的生物修复作用:①海带栽培对罗源湾养殖区海水的生物修复②海带室内培养对养殖废水的生物净化③海带营养吸收动力学特征④海带提取物对赤潮藻生长的抑制作用;二、建立海带无性繁殖系:①分离、培养福建海带配子体②无性繁殖系的丰富培养。主要研究结果如下:1.海带对罗源湾养殖区海水的生物修复在罗源湾海带生长旺盛期的3月~5月,与对照区相比,栽培区的DIN的降低率分别达到25.48%、19.62%、44.65%,DIP的降低率分别为20.17%、32.00%、38.72%。在3种主要的无机氮中,海带对NH4-N的降低率最高。3-5月份海带的平均组织氮磷含量分别为8.87%和1.68%,4月中旬鲜质量为533g达到最大。在收获期每公顷栽培的海带氮、磷拔除量分别为51.2kg、9.84kg。大面积海带栽培可改善罗源湾的水质状况,降低无机氮磷含量。2.海带对养殖废水的生物净化通过建立室内循环冷却水系统,低温、充气培养的环境条件下,发现在7d实验期间,海带个体对养殖废水的净化效果明显,3个实验组DIN的去除率可达到98%以上。同时海带在高营养盐的养殖废水中能正常生长,保持一定的日增长率,鲜质量及叶片长有所增加。3.海带主要营养盐的吸收动力学特征结合多瓶法和干扰法研究了海带在氮磷营养盐饥饿状态下4h内对NO3-N、 NH4-N、NO2-N及PO4-P的吸收动力学。海带对NO3-N、NH4-N及NO2-N的吸收存在3个不同的生理阶段,在10min内呈快速吸收阶段, Vmax分别为75.76μmol·g-1h-1、137.03μmol·g-1h-1及63.69μmol·g-1h-1,对应亲和力常数Km为15.04μmol·g-1h-1、37.04μmol·g-1h-1及13.97μmol·g-1h-1.P04-P的Vmax为38.22μmol·g-1h-1对应的Km值为26.99μmol·g-1h-1。研究表明在氮磷营养盐饥饿状态下海带对NO3-N、NH4-N、NO2-N及P04-P的吸收效果良好。4.海带提取物对赤潮藻生长的影响在藻培养液添加海带干粉、水溶性抽提液、海带蛋白以及海带5种有机溶剂(氯仿、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、甲醇)提取物均可对塔玛亚历山大藻和中肋骨条藻的生长产生抑制效果。塔玛亚历山大藻和中肋骨条藻分别在100g·L-1和60g·L-1水溶性抽提液、2g·L-1和0.1g·L-1海带蛋白、0.5g·L-1和0.01g·L-1有机提取物下完全致死。其中5种有机溶剂提取物对2种赤潮藻生长的抑制效应最强。5.海带无性繁殖系的建立通过分离和培养福建海带配子体,得到海带雌雄配子体的克隆体系,同时利用静置培养和摇床培养对细胞进行丰富培养,发现雄克隆球摇床培养每天的SGR比静置培养的高出3.58%,而雌克隆球高出3.92%。实验结束后,摇床振荡培养的雄克隆球平均质量是静置培养的1.82倍,雌克隆球为静置培养的2.15倍。
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