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目的 探讨溃疡性结肠炎患者血清中,细胞因子IL-1、IL-6、IL-10、IL-17、IL-22、IL-23及TNFα的表达及其意义。 方法 于2011年10月至2013年12月间,由中国医科大学附属第一医院收治的病人中,筛选53例确诊的溃疡性结肠炎患者,采取其血清样本为病例组(UC组),依据Truelove和Witts分级标准将病例分为轻度、中度和重度三组,其中轻度组13例,中度组15例,重度组25例。同时收集体检中心随机年龄组正常人血清16例作为对照组。于清晨空腹抽取肘静脉血5ml;对照组在体检时空腹抽取肘静脉血5ml,水平离心3000r/min10min,离心半径15cm,取血清于-80℃冻存备检。采用酶联免疫吸附测采用酶联免疫吸附实验测定(ELISA)检测组间血清中细胞因子IL-1、IL-6、IL-10、IL-17、IL-22、IL-23及TNFα的水平,其ELISA试剂盒均购于上海活乐生物技术有限公司,使用德国IFP公司生产的RT2100C全自动酶标仪,严格按照试剂盒说明进行操作。采用EXCEL软件绘制标准曲线,计算血清中细胞因子IL-1、IL-6、IL-10、IL-17、IL-22、IL-23及TNFα的含量。统计学处理中数据采用SPSS16.0统计软件进行分析,计量资料以均数±:标准差((x)±s)表示,两样本比较采用t检验,多个样本均数比较采用方差分析,多重比较采用LSD法;相关性分析采用Pearson或Spearman相关分析。 比较上述因子在不同分组中的表达和疾病严重程度的相关性及其之间的关系,为探索UC疾病的发病机制、早期临床诊断及新的治疗方法提供依据。 结果 1、UC组中血清中IL-1、IL-6、IL-10、IL-17、IL-22、IL-23及TNFα表达均显著高于对照组(P<0.01)。 2、将UC组按病情严重程度分级后,血清IL-1、IL-6、IL-10、IL-17、IL-22、IL-23及TNFα中重度组明显高于轻度组,分级与病情严重程度呈正相关(P<0.01)。 3、UC组中血清中IL-1、IL-6、IL-10、IL-17、IL-22、IL-23及TNFα间浓度水平相比较,各因子均存在正相关(P<0.01)。 结论 1、本研究显示UC组患者血清中致炎因子,白介素家族IL-1、IL-6、IL-10、IL-17、IL-22、IL-23及TNF-α水平较对照组明显升高,证实了IBD的发病机制与致炎因子在血清中高表达密切相关。 2、本研究显示UC组患者血清中致炎因子的水平随着病情的好转而下降,进一步证实这些细胞因子参与UC的发生发展过程且与病情轻重相关。这使得细胞因子,特别是白介素家族形成了UC治疗学上一个新的靶点。 3、本研究显示致炎因子间相互关系比较均>8.0,说明各因子间具有高度相关性。证实了致炎因子间相继发挥效应并相互间产生影响共同导致了UC疾病发生、发展及转归等过程。 4、本研究总结及对比,验证了前人关于UC血清分散实验中研究各个致炎因子结果所得出的结论,如:(1)IL-17诱导IL-6的产生使其表达;(2)IL-1趋化和激活IL-6;(3)TNFα在IL-6参与下高表达并与病变程度呈正相关;(4)IL-23能促进IL-17分泌,扩大炎性反应。 5、本研究依据本实验UC患者血清中IL-10及同源性IL-22高表达,结合国外UC鼠类模型实验得出结论,推断出IL-10及IL-22在人体血清中同鼠类一样可能存在保护作用。但机制是否与鼠类相同尚需通过进一步实验证实。