【摘 要】
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目的 为了了解人乳头瘤病毒(Human papillomavirus HPV)16的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用,利用腺病毒伴随病毒载体(AAV Helper-Free System)构建和表达携带人乳头瘤病
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目的 为了了解人乳头瘤病毒(Human papillomavirus HPV)16的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用,利用腺病毒伴随病毒载体(AAV Helper-Free System)构建和表达携带人乳头瘤病毒16型E6E7基因.方法 在pLXSN16E6E7质粒中经PCR扩增回收HPV16E6E7基因片段,连接于T载体上进行测序,将正确的HPV16E6E7插入pAAV-IRES-hrGFP质粒,协同pAAV-RC质粒和pHelper质粒共转染HEK293细胞,包装表达HPV16 E6E7基因的重组腺病毒伴随病毒.收获病毒,并检测病毒的感染效率.结论 腺病毒伴随病毒载体携带人乳头瘤病毒16型E6E7基因可感染细胞,并在细胞内表达,可望用于宫颈癌病因学的研究.目的 用人乳头瘤病毒(HPV16)E6E7基因感染胎儿宫颈上皮组织,建立人宫颈上皮永生化细胞.方法 含HPV16E6E7腺病毒伴随病毒重组病毒;感染胚胎宫颈上皮细胞培养,继续传代培养.光镜、电镜检查细胞形态和组织分型;PCR和激光共聚焦检查该病毒基因片段;软琼脂培养、集落形成率、染色体核型分析和scid小鼠接种观察生物学性质.结论 HPV16E6E7基因建立的宫颈上皮细胞系,支持HPV16E6E7是宫颈癌主要病因的观点,可进一步用以研究宫颈癌的病因和发病的相关机制.
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