中链脂肪酸-维生素C复方纳米脂质体的制备及性质研究

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脂质体技术是近年来新兴的靶向输送技术,它在食品工业、农业及医药等领域显示出了广阔的应用前景。目前脂质体产品主要是包封脂溶性成分,亲水性成分则存在包封率低的问题,对同时包封油水两相营养物的复方脂质体制备技术的报道甚少。   本论文以脂溶性营养物中链脂肪酸(MCFAs)和水溶性营养物维生素C为模型药物,采用传统方法(复乳法、逆向蒸发法等)、传统方法结合动态高压微射流(DHPM)法,制备中链脂肪酸-维生素C复方脂质体Ⅰ和DE-DHPM的复方纳米脂质体Ⅱ,并且研究了这两种脂质体的物理化学性质(粒径,Zeta电位,包封率,DSC,外观形貌,表面张力,长期贮藏稳定性,流变学,体外释放动力学)和生理功能(易供能性、抗氧化性和经皮渗透性)。   本论文建立了气相测定中链脂肪酸和透析紫外分光光度法测定维生素C的体外分析方法,研究了中链脂肪酸-维生素C复方脂质体Ⅰ和中链脂肪酸-维生素C复方纳米脂质体Ⅱ的各个配方和工艺因素。结果表明,复方脂质体Ⅰ的最优配方和工艺为:卵胆比为3:1,MCFAs浓度为10mg/mL,维生素C浓度为3mg/mL,总脂材:吐温为10:1,卵磷脂:无水乙醇=1:10(m/V),Vit.E:卵磷脂=4:100;复方纳米脂质体Ⅱ的最优配方和工艺为:适宜的总脂材含量为5.0%、卵胆比为3:1、制备温度为55℃、MCFAs浓度为10.0mg/mL、维生素C浓度为3.0mg/mL、Vit.E与总脂材质量比为4.0%、总脂材与Tween-80质量比为10:3。适宜的动态高压微射流操作压力为120MPa,动态高压微射流处理次数为2次。   本论文采用冷冻干燥技术制备了前体中链脂肪酸-维生素C复方纳米脂质体,研究了制备的配方和工艺因素。结果得出:适宜的预冻温度为-86℃,预冻时间为5h,干燥时间为48h,水化温度为室温,保护剂采用内加的形式,较好的冻干保护剂种类为蔗糖,蔗糖:大豆卵磷脂为2.5:1;在此条件下测得脂质体的粒径为94.6nm;维生素C和中链脂肪酸包封率分别为(61.37±3.75%,44.26±2.32%);Zeta电位为-35.4315±2.10mV。并通过DSC分析的结果分析冻干保护剂对脂质体的保护作用,初步探讨了糖类对脂质体的保护机制。   对中链脂肪酸-维生素C复方脂质体Ⅰ和复方纳米脂质体Ⅱ的质量进行了评价。结果表明:复方纳米脂质体Ⅱ较好,外观形貌呈球形或椭球形,粒度为92.8nm±3.2nm,zeta电位为-44.11±0.8mV,EEMCFAs为49.01%±6.5%,EEVit.C为58.19±0.4%,表面张力为37.09±0.59dyne/cm,粘度为1.89Pa.m,长期贮藏稳定性良好。研究了复方纳米脂质体Ⅱ中MCFAs和维生素C的药物累积释放量随时间的变化曲线并对其进行释放方程拟合,同时与MCFAs脂质体和维生素C脂质体的情况进行了比较。结果发现:Higuchi模型对复方脂质体的MCFAs体外释放拟合程度良好;维生素C药物释放符合零级释放动力学模型,拟合度良好。   研究了MCFAs纳米脂质体和中链脂肪酸-维生素C复方纳米脂质体的易供能性。结果表明:中链脂肪酸-维生素C复方纳米脂质体具有最好的效果,MCFAs纳米脂质体Ⅰ(95±7min)和复方纳米脂质体(93±8min)的高剂量组的负重游泳时间与正常组(53±13min)相比有显著差异;相比与空白组(11.49±1.36mmol/L),复方纳米脂质体组(4.05±0.90mmol/L,P<0.05)能明显降低LD水平,而与MCFAs纳米脂质体组(6.95±1.73mmol/L)差异不大;高剂量的MCFAs-Vit.C复方纳米脂质体组(11.85±1.09 mg/g)比水对照组(8.20±1.04mg/g)具有较高HG含量。另外,高剂量复方纳米脂质体组(691.5±53.4mg/L)和MCFAs脂质体组(655.2±38.5mg/L)均比正常组(1032.6±62.5mg/L)显著降低血清尿素氮水平(P<0.05)。   研究了中链脂肪酸-维生素C复方纳米脂质体和维生素C纳米脂质体的L-DOPA氧化酶抑制能力和DPPH自由基清除能力与维生素C水溶液差异不显著(p>0.05)。表明采用脂质体技术将维生素C包裹成相应的脂质体后,其抗氧化功能并没有受到影响。   同时与维生素C纳米脂质体和维生素C溶液为对照,研究了复方纳米脂质体的经皮渗透性。结果得出:复方纳米脂质体(22.52±1.03μg/cm2)与维生素C溶液(16.53±1.11μg/cm2)存在较大的区别(p<0.05),而维生素C脂质体和复方纳米脂质体的渗透率比较相近(p>0.05)。   总之,用DE-DHPM法制备的中链脂肪酸-维生素C复方纳米脂质体的物理化学性质稳定,可同时满足营养吸收障碍、肠胃炎患者补充能量与维生素C的需要,达到增效的目的。还有望将其制成喷雾、针剂等多种形式能进一步扩展其应用范围和用途。
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