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目的:探讨605nm羧基水溶性量子点双抗原夹心法在鼻咽癌标志物EBV EBNA1抗体中的快速检测及初步定量研究。方法:采用605nm羧基水溶性量子点共价交联的方法标记EBNA1抗原,量子点双抗原夹心法结合免疫层析技术及酶联免疫(elisa)法检测血清标本中EBNA1,并对其进行荧光半定量测定,初步绘制出EBNA1抗体标准品浓度吸光度标准曲线。结果:采用605nm羧基水溶性量子点和鼻咽癌EBV EBNA1抗原在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下共价交联,合成量子点标记的EBV EBNA1抗原,通过UV-2550紫外-可见分光光度计(SHIMADZU)和LS-55型荧光分光光度计证实605nm羧基水溶性量子点(PEG)-605已成功标记到EBNA1抗原上。采用605nm羧基水溶性量子点EBNA1双抗原夹心法结合elisa技术检测60例鼻咽癌患者及30例正常人血清中EBV抗体,灵敏度为91.67%,特异度为86.67%,使用中山生物工程有限公司生产的EBNA1IgA酶联免疫诊断试剂盒测得灵敏度为91.67%,特异度为80.00%,两种方法比较结果无明显差异,前者特异度稍高,但前者方法步骤更为简便,无需再加入显色剂。采用605nm羧基水溶性量子点双抗原夹心法结合免疫层析技术对不同浓度的EBVEBNA1抗体标准品进行荧光检测,发现当浓度低于25ng/mL时,即观察不到荧光。表明本方法对EBVEBNA1抗体标准品的检测最低检测限浓度为25ng/mL。利用605nm羧基水溶性量子点双抗原夹心法结合免疫层析技术快速检测60例鼻咽癌患者及30例正常人血清中EBV抗体,检测其flisa荧光度值,检测时间仅需3-10min,而传统的ELISA检测方法步骤繁琐,需数小时,统计分析证明鼻咽癌血清组和正常成人血清组所测的吸光度值差异明显,有统计学意义。并初步绘制出EBNA1抗体标准品浓度吸光度标准曲线,曲线相关系数R2=0.997,说明有比较好的相关性,可以实现实现样品的浓度测定。本实验对鼻咽癌患者血清及正常成人血清flisa吸光度值进行ROC统计,确定Flisa荧光值诊断鼻咽癌的最佳临界值为0.680817。该点灵敏度91.70%,特异度90.00%, Youden指数0.817,达到了理想的实验结果,并统计分析可疑值范围是(1.000988,1.091343)。结论:1)通过共价交联法已经实现羧基水溶性量子点与鼻咽癌EBNA1抗原的成功标记。2)量子点双抗原夹心法结合elisa技术检测切实可行,检测结果与传统的酶联免疫法相符,且无需加入显色剂。3)量子点双抗原夹心法结合免疫层析技术检测切实可行,比elisa检测技术更为快捷,检测过程仅需3~10min。4)初步绘制出EBNA1抗体标准品浓度吸光度标准曲线,可以实现样品的浓度测定,ROC统计,确定Flisa荧光值诊断鼻咽癌的最佳临界值为0.680817。该点灵敏度91.70%,特异度90.00%,Youden指数0.817,并统计分析可疑值范围是(1.000988,1.091343)。图13幅,表6个,参考文献40篇