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水稻稻曲病是由稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)引起的水稻穗部病害,在全世界不同稻作区均有发生,并在近年呈加重趋势。稻曲病的发生与流行、病菌遗传多样性、病菌毒素等内容是国内外学者研究的重点。然而,由于稻曲病菌独特的生物学特性,其侵染水稻的行为研究相对较少,在病害的初侵染来源、病菌侵染过程等方面仍存在争议。据此,本文针对上述相关问题进行了探究,研究结果如下:1)稻曲病菌对水稻种子萌发及秧苗生长的影响采用水琼脂法和沙培法对水稻种子分别进行稻曲病菌厚垣孢子、分生孢子和菌丝体拌种以及病菌培养滤液浸种处理,结果表明,厚垣孢子拌种对水稻种子的发芽和苗期生长影响最大,且随着厚垣孢子浓度提高其抑制作用增强;分生孢子及菌丝拌种对水稻种子发芽及苗期生长没有显著影响;除病菌培养滤液10倍稀释液浸种处理12h对晚籼98、港育129两个品种的发芽和生长均具有促进作用外,其它处理对种子发芽及苗期生长没有显著影响。2)种子寄藏稻曲病菌的检测方法设计并筛选了针对稻曲病菌的两对特异性引物UV-F3/UV-R3、UV279-F/UV693-R,其中引物UV279-F/UV693-R特异性强,检测灵敏度达25pg/μL病菌DNA样品;利用这对引物对人工模拟接种的种子表面及内部带菌进行检测,建立了稳定、灵敏、快速的水稻种子携带稻曲病菌分子检测方法;运用该方法检测了我国不同来源地74份水稻种子样品,结果表明种子外部和内部稻曲病菌检出率分别为39.2%和13.5%。3)人工条件下稻曲病菌穗部接种致病体系在温室条件下,以菌丝-分生孢子混合液作为接种体,分生孢子浓度为2×106个/mL,接种量为1-2mL,于水稻破口前4-8d注射接种稻穗中部;接种期温室温度为25~36℃,湿度保持在90%,接种后保持该温湿度条件5-7d,能使接种植株稳定发病。病情调查结果显示,在供试的EGFP-P3、 P3、ZJ0202, LN-201-1、LN-DG-5、LZ-09-1-1、09W-4共7个稻曲病菌菌株中,EGFP-P3及其野生菌株P3的致病力最强;水稻品种晚籼98和甬优9号可作为高感材料用于后续试验。4)水稻穗期稻曲病菌的侵染过程在稻穗部接种后第12h、24h、36h、84h、134h、168h、192h、216h分别取样,利用激光共聚焦显微镜观察穗部结果显示,接种24h后稻曲病菌即可侵入小穗内部,侵染率为10%;接种后第168h侵染率值达到最大,为86.7%;穗部侵染过程观察显示,菌丝侵入小穗内部后,最初定殖在花丝基部,由花丝基部逐步蔓延至花药间隙及雌蕊外围,至花药顶端后迅速扩展包裹整个小穗内部,逐步膨大、突破颖壳并形成稻曲球。5)稻曲病菌侵染对水稻小穗结构及活性氧产生的影响研究表明,稻曲病菌侵染会导致水稻花粉粒畸形、雌蕊发育受抑制、小穗无法正常扬花授粉,抑制谷粒的正常形成,造成稻曲球及白色秕粒产生。受侵染小穗的H2O2含量均高于对照,其中处于突破颖壳期的受侵染小穗H2O2含量是对照的7倍;形成白色秕粒的小穗H2O2含量最高,是对照的11倍;二氨基联苯胺染色显示,形成稻曲球的小穗中,在受侵染小穗的花药基部、花药顶端、浆片等部位颜色变深,形成H2O2富集区;形成白色秕粒的小穗中,H2O2富集的特征更为明显,富集区域与病菌在小穗内的侵染途径密切相关。本研究同时实施了稻曲病菌不同菌体拌种及土壤接菌播种试验,于水稻不同生育期取样进行激光共聚焦显微观察、成熟期症状调查及分子检测分析,试验结果暂不能支持“种子或土壤带菌可以作为稻曲病初侵染来源”的假设。