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盘基网柄菌是一种社会变形虫,在营养丰富情况下,以二分裂方式繁殖后代;当食物耗尽时,进入多细胞发育阶段,形成由柄细胞和孢子细胞组成的子实体,整个发育过程约需24h,大致分4个阶段:细胞聚集阶段,细胞丘,蛞蝓体和子实体。一旦条件合适,孢子细胞萌发开始新生命周期,而柄细胞无论用什么条件都不能萌发,因此柄细胞是死亡细胞。可见盘基网柄菌细胞发育和高等生物发育相似,存在着细胞分化和细胞凋亡现象,然而对盘基网柄菌多细胞发育过程中细胞分化和凋亡的形态特征还不是十分清楚。食物泡在细胞聚集期逐渐消失。在细胞丘阶段细胞有了初步分化,不同类型的细胞是否相对应地出现不同的结构,前孢子细胞是空泡前孢子细胞所特有的结构,但这种空泡是怎样产生和消失的,其作用如何到目前为止还不是很清楚;自噬泡是前柄细胞的特征,但对自噬泡在柄细胞凋亡过程中的作用和变化未作深入研究;对细胞核形态变化也未作深入研究。柄细胞最终死亡并被纤维素组成的细胞壁所包裹。以上这些研究工作大都集中于某一部分,对细胞分化和凋亡的动态的形态特征缺乏细致的研究,对凋亡细胞中细胞核消除过程也不甚了解。
作者用透射电镜和DAPI荧光染色法研究了盘基网柄菌细胞分化和柄细胞的凋亡特征。结果显示:细胞丘中绝大部分细胞的线粒体内出现一小空泡,随着发育进程,空泡逐渐增大,线粒体的嵴随之变少,直至线粒体完全空泡化,最后形成单层膜的空泡;据此作者推测前孢子细胞特有的空泡来源于线粒体,并且这种细胞器水平上的内自噬现象与前孢子细胞分化密切相关。在前柄细胞分化阶段,前柄细胞中出现数个自噬泡,最初吞噬的线粒体嵴结构完整;随着前柄细胞进一步分化,部分线粒体内出现类似于前孢子细胞中出现的内自噬现象,并且自噬泡只吞噬这种线粒体。在凋亡后期,细胞核内核仁消失,染色体固缩形成高电子密度斑块,自噬泡采用与细胞核膜融合的方式来完成核的清除,最后柄细胞完全空泡化且包被一层纤维素壁。作者认为前柄细胞凋亡过程实质上是一种分化过程,所以有其鲜明特点:细胞出现自噬泡,标志着凋亡开始,用自噬而不是凋亡小体来清除胞内各种细胞器,直到分化最后阶段才清除细胞核和形成纤维素壁。所以这些特点不仅是前柄细胞凋亡的形态学指标,也和细胞发育和分化相关。
借助电镜酶细胞化学的手段作者又观察了线粒体内自噬,自噬泡以及细胞核的内酸性磷酸酶的变化过程。线粒体中酶反应颗粒出现在细胞丘阶段线粒体内自噬空泡形成时,随着内自噬空泡的逐渐增大,线粒体内嵴结构的不断破坏,线粒体内的酶反应颗粒逐渐增多直至遍布整个空泡化的线粒体内,当细胞发育至前孢子细胞时,由于嵴结构被完全破坏,空泡化的线粒体内酶反应颗粒逐渐消失,酶反应颗粒主要集中在前孢子细胞空泡的单层膜上。细胞核中的酶反应颗粒出现在凋亡中期的前柄细胞中,在细胞核中均匀分布,直至细胞核被自噬泡融合。作者认为线粒体内酸性磷酸酶的发现为从细胞器水平上确定凋亡形态学特征提供了进一步的证据,而细胞核中的酸性磷酸酶作为一种非溶酶体酸性磷酸酶可能参与细胞核中核蛋白的脱磷酸化过程,与纤维素细胞壁基因的表达有关。