郑氏一号新伤药对大鼠跟腱末端病的防治效果和Caspase12蛋白诱导细胞凋亡的机制研究

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目的:观察郑氏一号新伤药对电击跳跃诱导的大鼠跟腱末端病的防治效果,和对Caspase12蛋白诱导细胞凋亡的机制研究,探讨中药外敷对大鼠诱导模型跟腱末端组织的干预效果及其作用机制,为该药临床使用提供理论依据。方法:将72只雄性Wistar大鼠随机分为K组(空白对照组)、T组(单独跳跃组)、F组(敷药跳跃组),每组再按取材时间点随机分为4周组,6周组,8周组,每组8只。K组自然喂养,T组、F组采用“电击跳跃法”造模,且F组从第4周开始外敷郑氏一号新伤药干预。观察大鼠一般情况(毛发、神态、体力状况等)和有效跳跃次数后,分别于第4、6、8周末取跟腱末端组织,HE染色观察组织形态学变化,Tunel法检测细胞凋亡指数,Western Blot法检测Caspase12蛋白表达。结果:1.大体情况观察:K组大鼠一般情况良好,造模组(T组、F组)大鼠跳跃后表现为神态倦怠,皮毛凌乱,体力下降,但F组优于T组。2.有效跳跃次数:造模组(T组、F组)跳跃过程中整体呈下降趋势,且F组优于T组,在4~7周存在显著性差异。3.HE染色组织形态学观察:第4、6、8周末,K组大鼠腱纤维均呈波状排列,“潮线清晰”未见细胞数量明显改变及新生血管长入。第4周末,T组大鼠腱纤维紊乱,部分断裂,F组腱纤维欠规整,可见细胞数量稍增多。第6周末,T组腱纤维断裂增多,呈“玻璃样变”,未见涨潮及退潮表现,可见明显细胞数量增多,少量新生血管长入。F组见腱组织明显细胞增多及新生血管,潮线模糊。第8周末,T组腱组织呈典型“玻璃样变”,潮线呈“火焰样变”、“涨潮”表现,细胞增多,F组见较多新生毛细血管长入,潮线模糊。4.细胞凋亡学检测:(1)组内分析:K组、F组从第4周到第8周整体呈下降趋势,T组呈缓慢上升趋势。K组、T组组内无显著性差异,P>0.05;F组内第4周与第8周间存在显著性差异,P<0.05。(2)组间分析:第4周,T组、F组均明显高于K组,K组、F组与T组间存在显著性差异,P<0.05;第6周,T组较高,T组与K组之间出现显著性差异,P<0.05;第8周时,T组明显高于K组、F组,且与两组之间出现显著性差异,P<0.05。5.Caspase12蛋白表达情况:(1)组内结果:K组、F组变化平缓,T组呈先上升后下降趋势,K组、T组、F组在第4、6、8周组内对比分析无显著性差异,P>0.05。(2)组间结果:第4周,T组、F组高于K组,K组与T组、F组之间存在显著性差异,P<0.05,T组与F组无显著性差异,P>0.05;第6周时,T组高于其余两组,K组、T组与K组之间均存出现显著性差异,P<0.05;第8周时,T组高于其余两组,仅K组与T跳跃组之间存在显著性差异,P<0.05。T组与F组之间无显著性差异,P>0.05。结论:1.郑氏一号新伤药,可以有效延缓末端病的病理变化,对于大鼠跟腱末端病有防治作用。2.在末端病形成过程中,发现Caspase12蛋白表达与细胞凋亡情况呈有关性联系,Caspase12蛋白通过内质网通路可有效调控细胞凋亡的发展。3.郑氏一号新伤药通过调控Caspase12蛋白表达,有效抑制组织细胞凋亡,达到延缓末端病理变化,对跟腱末端病产生防治作用。
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