【摘 要】
：
单核细胞增多性李斯特菌,简称单増李斯特菌（Listeria monocytogenes）,是一种革兰阳性胞内寄生菌。李斯特菌能在细胞间迁移,刺激机体促进抗原特异性CD4+T细胞和CD8+T细胞增殖来产生适应性细胞免疫,因此是一种优质的活载体疫苗候选。由于野生型李斯特菌毒力很强,因此研究以李斯特菌为疫苗载体的团队致力于研发多种策略降低李斯特菌的毒力。在实验室前期研究中,通过对基因组进行改造,构建了两
【基金项目】
：
国家自然科学基金（31902280,31872620和31770040）；
论文部分内容阅读
单核细胞增多性李斯特菌,简称单増李斯特菌（Listeria monocytogenes）,是一种革兰阳性胞内寄生菌。李斯特菌能在细胞间迁移,刺激机体促进抗原特异性CD4+T细胞和CD8+T细胞增殖来产生适应性细胞免疫,因此是一种优质的活载体疫苗候选。由于野生型李斯特菌毒力很强,因此研究以李斯特菌为疫苗载体的团队致力于研发多种策略降低李斯特菌的毒力。在实验室前期研究中,通过对基因组进行改造,构建了两株减毒李斯特菌株LADS和LAPD。试验发现这两株减毒李斯特菌的毒力显著降低,溶血活性明显低于野生菌株,且保持正常的细胞间的迁移能力。本研究旨在探讨这两种减毒李斯特菌的免疫原性与安全性,以评估李斯特菌作为活疫苗载体的潜力,并以这两种减毒李斯特菌作为背景菌株,递送外源抗原,并对其在动物模型中产生的免疫保护进行评价,为李斯特菌在今后作为抗原呈递的疫苗载体研究奠定基础。1.探究减毒李斯特菌LADS和LAPD的免疫原性本研究通过感染小鼠模型探究LAPD的毒力并进行脏器清除试验,同时探究LAPD和LADS的免疫原性。试验结果表明,LAPD的LD50是109.19 CFU,毒力较野生株显著降低,且小鼠脏器可在一周内将细菌清除,因此初步认定LAPD作为疫苗载体是安全的。通过探究两株减毒李斯特菌的免疫原性,发现LAPD和LADS保留了完好的免疫原性,LADS的免疫原性优于LAPD。2.基于LADS为载体构建抗嗜水气单胞菌感染疫苗及其免疫预防效果评估本研究以LADS为载体,以同源重组的方式将嗜水气单胞菌外源抗原克隆至hly下游构建了LADS-OmpW。试验结果表明,OmpW抗原不影响LADS的正常的体外生长能力和溶血能力,同时可以与LLO融合表达。通过在小鼠和斑马鱼上的免疫保护研究发现,LADS和LADS-OmpW可以对感染嗜水气单胞菌的小鼠提供高于对照组88.8%的保护,对感染嗜水气单胞菌的斑马鱼提供高于对照组32.5%的免疫保护,说明LADS和LADS-OmpW对嗜水气单胞菌感染有显著的预防作用。3.基于LAPD为载体构建宫颈癌疫苗及其对宫颈癌的防治效果评价采用与LADS-OmpW相同的构建策略以LAPD为背景菌株呈递宫颈癌抗原E7基因,构建了LAPD-E7。试验证明,E7能与LLO融合表达,并且不影响LAPD本身的体外生长能力和溶血活性。采用实验室构建肿瘤的策略在C57BL/6小鼠上构建肿瘤模型并通过尾静脉注射LAPD-E7对其进行治疗,通过对小鼠肿瘤体积的定期测量评估治疗效果,结果显示经过两次治疗后,对照组的肿瘤平均体积长至512.41 mm~3,而免疫组小鼠的肿瘤体积仅长至161.12 mm~3,说明LAPD-E7的免疫对肿瘤的生长具有明显的抑制作用。在通过对小鼠宫颈癌的免疫预防试验中,分别于第1天和第14天对小鼠进行免疫,免疫接种七天后,将肿瘤接种在小鼠腹部皮下,定期测量肿瘤大小发现,对照组小鼠的肿瘤平均长至57.38 mm~3,而疫苗组的小鼠肿瘤平均大小为3.86 mm~3,且疫苗组有三只小鼠并未长出肿瘤,说明LAPD-E7对宫颈癌有一定的预防效果。综上,本研究验证了两个不同减毒策略的李斯特菌具有相对完整免疫原性,并成功构建了疫苗菌株,证实了LADS-OmpW和LADS对嗜水气单胞菌具有保护作用;LAPD-E7对宫颈癌肿瘤有显著治疗效果和预防作用。本研究进一步表明以减毒李斯特菌为载体应用于抗感染和抗肿瘤方向具有巨大的潜力。
其他文献
纳米纤维基多孔材料在具备低密度和高孔隙率基础上,融入了纤维素可再生、可生物降解、良好的生物相容性和低成本等优势,成为了继无机矿物和石油基聚合物的新一代材料。纳米纤维基多孔材料作为天然高分子基的材料,在催化剂载体、隔热、储能、电磁干扰、生物医学和吸附剂等领域被广泛应用。其中,利用自然界丰富的纤维素,对废水中的染料和油污进行吸附和分离,能够有效解决废水治理问题,对天然资源的利用和环境修复都具有重要意义
双酚A（Bisphenol A,BPA）是一种化学合成的环境内分泌干扰物,广泛用于聚碳酸酯和环氧树脂等高分子材料制作。塑料制品中的BPA在温度、时间或酸碱度改变下得以释放,引起动物机体各个系统功能障碍,影响动物的生长发育。B PA相关研究也是近年来的研究热点之一,它不仅影响内分泌系统的正常功能,还破坏生物体氧化稳态。褪黑素（Melatonin,MLT）作为一种抗氧化剂,能有效清除体内氧自由基,缓解
语言是文化的载体,二者互相依存,密不可分。随着对外汉语教学事业日益蓬勃发展,来华留学生日益增多,古代汉语在对外汉语教学中的位置日益凸显。一方面,古代汉语的语音、语法等知识是现代汉语的"源头",二者具有依存、传承的关系,学好古代汉语也有利于学生现代汉语知识的学习;另一方面,汉语的学习不仅是知识的学习,也有文化方面的学习。学好古代汉语有利于学生了解中华传统文化,激发他们学习汉语的热情。该文从对外汉语教
副溶血性弧菌是一种革兰阴性菌,无芽胞,通常呈杆状,弧状。该菌一般生长在海水以及海口环境中。副溶血性弧菌一般寄宿在鱼、虾、蟹体内,造成鱼、虾、蟹的大量死亡,给水产养殖带来经济损失。人如果误食了带有副溶血弧菌的海产品,会引起腹痛、腹泻、呕吐等临床症状。EnvZ/OmpR是广泛存在于细菌中的一对双组分系统,由跨膜信号传感器EnvZ和效应器OmpR组成。传感器EnvZ能够将外界刺激转化为信号分子,完成磷酸
痹证的病机较为复杂，与寒冷密切相关。本文以天人相应理论、开阖枢理论和络脉理论为基础，对寒地痹证的病因病机和治疗方法进行了理论探讨，以期为寒地痹证的防治提供参考。
为了建立标准贯入试验与土体其他物理力学参数之间精细化和定量化的相关关系，以福建省某迁建项目为例，基于一维阿尔伯特波动理论，求解了弹性应力波加速度与速度、位移的关系；运用现场实测的手段，采集了不同土层标准贯入锤击条件下的弹性应力波加速度时程曲线，建立了与标贯击数对应的应力波最大速度与土体地基承载力特征值、内摩擦角的相关关系。结果表明，弹性应力波最大速度与地基承载力特征值存在显著的对数关系，与内摩擦角
随着国内旅游产业进入了新发展阶段,旅游产业对经济发展的贡献日益增大,旅游客源市场逐渐成熟完善,区域旅游产业的竞争主要趋向于客源市场的竞争。如何掌握客源行为偏好,优化旅游客源市场,构建旅游产业新发展格局,形成高质量发展模式,成为旅游产业研究的主要方向。本文以福州市旅游产业作为研究对象,运用PEST、SWOT、地理集中指数等研究方法,从全域旅游的视角对福州市旅游产业的发展态势、优势、劣势、机遇与挑战进
目的 分析H型高血压的影响因素，并构建其预测模型。方法 收集2020—2021年新疆医科大学第一附属医院综合内三科收治的高血压患者520例，根据血清同型半胱氨酸（Hcy）将其分为单纯高血压组（Hcy＜15μmol/L,n=381）和H型高血压组（Hcy≥15μmol/L,n=139）。比较两组临床资料和实验室检查指标，高血压患者血清Hcy影响因素分析采用单因素、多因素线性回归分析，H型高血压的影响
本文以轿子山国家级自然保护区急尖长苞冷杉林、黄背栎林、高山柏林、亚高山草甸、杜鹃矮林、杜鹃灌丛6种植被类型为研究对象,在相应的植被类型下设置20m×20m的样方,采集样方内6种植被类型的叶片、茎、凋落叶、根系和土壤,并进行室内实验测定与分析。通过对6种植被类型叶片、茎、凋落叶、根系、土壤的C、N、P含量以及化学计量比、生态化学计量内稳性进行系统研究,结果表明:（1）随海拔升高,急尖长苞冷杉林土壤C
氧化应激可造成黄羽肉鸡生产性能降低40-50%,死亡率提高20%以上,给家禽养殖业带来严重经济损失。氧化应激导致的肠上皮紧密连接（tight junction,TJ）屏障破坏是造成肉鸡生产性能降低的主要原因。本项目拟通过高氟（high fluoride,HF）诱导的肉鸡肠道氧化应激实验,研究亚硒酸钠（sodium selenite,SS）和硒代蛋氨酸（selenomethionine,Se-Met