CD4<'+>CD25<'+>调节性T细胞在前房相关免疫偏离中的作用研究

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本文研究了CD4+CD25+regulatoryTcells在前房相关免疫偏离中的作用。材料和方法:首先用PE-anti-CD3,FITC-anti-CD4,PE-CY5-anti-CD25标记ACAID鼠脾单细胞悬液,用流式细胞仪观察CD4+CD25+Tcells占CD4+Tcells的频率改变。第二,用荧光定量PCR检测磁珠(MACS)分选CD4+CD25+Tcells和CD4+CD25-TcellsFoxp3的表达。第三,体外增殖抑制实验,用[3H]thymidine渗入法和MTT法观察MACS分选的naive鼠CD4+CD25+Tcells对CD4+CD25-Tcells的抑制效应,并比较[3H]thymidine渗入法和MTT法检测细胞增殖的准确性;进一步用MTT法观察磁珠分选的ACAID鼠CD4+CD25+Tcells对CD4+CD25-Tcells的抑制效应。第四,ELISA观察分选的CD4+CD25+Tcells和CD4+CD25-Tcells细胞因子IL-10,TGF-β1的表达。最后进行体内阻断实验,进一步观察CD4+CD25+Tcells在前房相关免疫偏离中的作用。用anti-CD25抗体删除BALB/c鼠CD25分子,随后前房内注入OVA,观察前房相关免疫偏离是否形成,并评价脾中CD4+CD25+Tcells占CD4+T细胞的比例改变。统计方法:统计软件SPSS11.5.用单因素方差分析(ANOVA)-dunnett-ttest进行统计.p<0.05具有统计学意义。结果:在前房相关免疫偏离的形成和维持中,CD4+CD25+Tcells占脾中CD4+T细胞的比例增加,而且CD4+CD25+Tcell的Foxp3mRNA表达水平也升高;分选的naive鼠CD4+CD25+Tcells对CD4+CD25-Tcells具有抑制效应,且具有剂量依赖性;ACAID鼠CD4+CD25+Tcells对CD4+CD25-Tcells的这种抑制效应明显增强。CD4+CD25+Tcells表达高水平IL-10,而TGF-β1的表达与正常和阳性对照以及CD4+CD25-Tcells的表达相比差别无统计学意义。体内阻断实验证实,体内删除CD25分子不能诱导前房相关免疫偏离的形成。结论:CD4+CD25+Tcells在前房相关免疫偏离中可能起重要作用,提示体内利用CD4+CD25+Tcells进行治疗的可能性。  
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