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硫酸黏杆菌素（Colistin Sulfate）,又称硫酸黏菌素、多黏菌素E（Polymyxin E）等,它是从多黏杆菌培养液中获得的碱性琐环状多肽类（Polypeptide system）抗生素。硫酸黏杆菌素是一种多组分多肽抗生素,主要由硫酸黏杆菌素A和B组成,被认为是治疗由多重耐药革兰氏阴性细菌引起感染的最后手段。硫酸黏杆菌素在全世界范围内还被用于促进畜禽生长、预防和控制疾病。硫酸黏杆菌素在畜牧业中的广泛使用导致大量硫酸黏杆菌素通过动物的尿液和粪便进入周围环境,可能导致硫酸黏杆菌素耐药细菌的流行和对生态环境造成影响。目前,国内外对硫酸黏杆菌素在畜禽体内的代谢转归以及环境行为的研究较少,不能对硫酸黏杆菌素的环境风险做出客观评价。因此,本研究以超高效液相色谱串联质谱的高分辨率、高灵敏度和精确质量测量特性为基础,建立硫酸黏杆菌素的超高效液相串联质谱（UPLC-MS/MS）方法,测定猪、鸡胃肠道中硫酸黏杆菌素的含量,研究硫酸黏杆菌素在猪、鸡胃肠道中代谢和吸收情况,以及不同土壤中硫酸黏杆菌素的吸附、解吸附、迁移和降解等行为,结果如下:1.建立了硫酸黏杆菌素的UPLC-MS/MS测定方法。超高效液相色谱采用美国Thermo Uti Mate 3000 UPLC系统,配备Acquity UPLC BEH C18色谱柱（1.7μm;2.1 mm×100 mm）;流动相A为0.5%乙腈-0.2%甲酸水溶液,流动相B为100%乙腈;柱温20℃;进样量为5μL。质谱仪为四极杆轨道阱MS/MS系统（Q Exactive）,质谱条件为HESI离子源,喷雾电压3200 V,毛细管温度320℃,鞘气体积流量25 psi,辅助气体积流量15 psi。定量分析在选择反应监测（SRM）扫描模式下进行。监测反应离子和保留时间（t R）如下:硫酸黏杆菌素A([M+3H]3+),m/z390.60＞101.0696,241.1860,t R=7.30 min;硫酸黏杆菌素B([M+3H]3+),m/z385.90＞101.0696,227.1710,t R=6.85 min。碎片离子的m/z容差设置为5 ppm,保留时间的偏差不超过5%。建立了硫酸黏杆菌素在猪、鸡胃肠道内容物及粪便中的前处理方法,前处理方法:将样品冷冻干燥,然后用10%三氯乙酸:乙腈（40:60,v/v）提取2次,将提取液p H调节到9.0。将提取液用WCX固相萃取小柱进行萃取。洗脱液在50℃下真空离心浓缩,然后用去离子水复溶进样分析。该方法硫酸黏杆菌素在10～500 ng/m L的范围内浓度和峰面积呈现良好的线性关系,回收率在73.2%～103.9%之间,相对标准偏差（RSD）在4.45%～7.98%之间。不同基质中,硫酸黏杆菌素的检测限范围为0.11～0.56 ng/g,最低定量限为0.37 ng/g。该方法满足试验要求,可用于测定猪、鸡胃肠道及粪便中硫酸黏杆菌素含量。2.研究了硫酸黏杆菌素在猪、鸡胃肠道中的吸收情况。选用断奶仔猪和科宝（cobb）肉鸡进行为期14 d的饲养试验,在猪、鸡的基础日粮中添加硫酸黏杆菌素使得浓度为20 mg/kg。通过测定猪、鸡胃肠道及粪便中硫酸黏杆菌素的含量,研究了硫酸黏杆菌素在猪、鸡胃肠道中的代谢转归和吸收情况。研究结果表明,在检测的仔猪胃肠道内容物样品中,粪便中硫酸黏杆菌素含量最高,为1248.3ng/g,十二指肠和空肠中硫酸黏杆菌素含量较低,表明硫酸黏杆菌素的吸收可能发生在十二指肠和空肠中。猪盲肠内容物中硫酸黏杆菌素含量较高,可能是因为硫酸黏杆菌素在盲肠中的吸收减少和蓄积。在肉鸡样品中,盲肠内容物中硫酸黏杆菌素含量最高,为4882.9 ng/g,从肉鸡的腺胃和十二指肠内容物中检测到的硫酸黏杆菌素浓度最低,这表明腺胃和十二指肠可能是主要的吸收位置。空肠、回肠和盲肠内容物中硫酸黏杆菌素的平均浓度逐渐升高,表明这些部位对硫酸黏杆菌素的吸收较少或没有吸收。3.研究了硫酸黏杆菌素在3种土壤（砂壤土、壤土、砂土）中的吸附与解吸附行为。结果显示,Freundlich模型可以较好的描述硫酸黏杆菌素在3种土壤中的吸附行为,R~2为0.9139～0.9853。3种土壤对硫酸黏杆菌素的吸附强度（1/n）在0.6897～1.3333之间,差异较小,3种土壤对硫酸黏杆菌素都具有中等吸附亲和力,其中砂壤土吸附能力最强,壤土吸附能力最弱。3种土壤对硫酸黏杆菌素的吸附几乎不可逆。4.研究了硫酸黏菌素在环境中的迁移过程。通过将含有硫酸黏杆菌素的鸡粪与砂壤土进行好氧堆肥和厌氧堆肥,检测土壤中的硫酸黏杆菌素。结果表明,堆肥中的硫酸黏杆菌素能迅速进入土壤并在土壤中存留一定时间,并有少量硫酸黏杆菌素会迁移至土壤表层下20 cm处。5.研究了硫酸黏杆菌素在砂壤土中的降解行为。通过模拟自然条件下的土壤微观环境,对3种浓度（10、20、40μg/g）硫酸黏杆菌素在砂壤土中的降解行为进行了研究。结果表明,硫酸黏杆菌素在砂壤土中的降解比较缓慢,硫酸黏杆菌素浓度越高,降解越慢,初始浓度为10μg/g和20μg/g的硫酸黏杆菌素降解半衰期分别为13.15 d和19.15 d,40μg/g的为29.65 d。浓度为10～40μg/g的硫酸黏杆菌素进入砂壤土中后可长期残存在土壤中,约65.75～148.25 d后可被基本消除。综上所述,本研究建立的检测方法可用于测定猪、鸡胃肠道和粪便、土壤中硫酸黏杆菌素的含量,有助于了解硫酸黏杆菌素在猪、鸡胃肠道中的吸收情况,以及研究硫酸黏杆菌素在土壤中的吸附、解吸附、降解和迁移等行为,为硫酸黏杆菌素的环境风险评估提供参考信息。