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目的:构建过表达SGK3的p CDH-SGK3质粒并将其转染构建稳定过表达的SGK3肝癌细胞系BEL-7402,SMMC-7721,研究SGK3在肝癌细胞中对其下游信号通路的调控以及其对肝癌细胞在去甾体激素FBS中的抗凋亡能力的影响。方法:(1)使用PCR扩增出SGK3基因片段,将产物连接到p CDH载体上,构建出p CDH-SGK3的慢病毒质粒,将其同空白对照p CDH-NC分别与慢病毒包装载体共转入293T细胞,包装成慢病毒Lentivirus-SGK3和Lentivirus-NC。将此慢病毒感染肝癌细胞BEL-7402、SMMC-7721并用嘌呤霉素筛选,获得稳定过表达SGK3细胞株。(2)Western Blot检测SGK3表达,CCK-8法观察转染后稳定过表达SGK3肝癌细胞及其空白对照组的生长情况,以及Western Blot检测SGK3在肝癌细胞中对下游分子GSK3β、S6的调控。(3)观察SGK3在10%FBS以及10%去甾体激素FBS条件下的生长情况,并使用Western Blot方法检测胞内C-PARP及p S6的变化,揭示SGK3增强肝癌细胞BEL-7402在去甾体激素FBS培养下的抗凋亡能力。结果:(1)成功构建出p CDH-SGK3重组慢病毒载体,并将此慢病毒载体及其空白对照感染至肝癌细胞系BEL-7402、SMMC-7721中并成功表达。(2)CCK-8实验表明稳定过表达SGK3可促进肝癌细胞的生长,但却不能有意义地改变SMMC-7721肝癌细胞的的生长,Western Blot检测稳定过表达SGK3的BEL-7402肝癌细胞及其空白对照组中GSK3β的磷酸化及不同浓度血清培养下S6的磷酸化变化,阐释了SGK3在肝癌细胞中对其下游信号通路的影响。(3)肝癌细胞BEL-7402在去甾体激素血清中生长受到抑制,Western Blot检测到7402细胞中有雄激素受体的表达。SGK3在去甾体激素FBS中通过对下游分子的调控增强肝癌细胞的抗凋亡能力。结论:(1)在肝癌细胞BEL-7402中过表达SGK3可促进其生长,但这并不是对所有肝癌细胞都有相同的效果。(2)SGK3在BEL7402细胞中可以激活GSK3β,且能在低浓度血清情况下可激活S6,这说明SGK3参与了PI3K/AKT这条通路的胞内信号转导,但其对细胞信号的转导可能并不是占主导地位。(3)SGK3可通过对其下游的激活调控增强细胞在去甾体激素FBS中的抗凋亡能力。