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溪蟹广泛分布在我国的淡水水域中,而长江华溪蟹(Sinopotamon yangtsekiense)是此类动物中的代表动物之一。重金属汞对该物种的影响在一定程度上可反映出重金属对水体内十足类甲壳动物的影响。本实验在细胞和分子水平上,采用体外暴露的方式,研究了汞对长江华溪蟹主要组织器官的影响。 本实验共分四个部分。 1.汞在长江华溪蟹四种器官的积累 以体外暴露的方式,采用还原气化原子吸收的方法,测定了长江华溪蟹鳃、心脏、肝胰腺和性腺中汞的积累情况。结果表明:汞在蟹体内的积累具有一定的选择性,其总的生物积累量由高到低的顺序为鳃>心脏>肝胰腺>性腺,并且积累量有着一定的浓度—效应关系;在高浓度汞处理下,其积累量还具有一定的时间—效应关系。 2.汞对长江华溪蟹心肌细胞超微结构的影响 应用透射电镜的方法,研究了汞在12天、28天及48天内对长江华溪蟹心肌细胞超微结构的影响。结果表明:在汞处理初期,心肌细胞核膜突出,核仁分布于近核膜区,线粒体聚集成线粒体球,肌原纤维有部分肿胀。随着处理时间的延长,心肌细胞核膜呈弥散状,部分解体,核仁位于核中央,甚至碎裂;线粒体嵴大部分解体,膜溶解,呈空泡化,线粒体内还出现了黑色颗粒,并随处理时间的延长而增多;肌原纤维断裂较为严重。 3.汞对长江华溪蟹四种器官酯酶同工酶的影响 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,以体外暴露的方式,测定了长江华溪蟹鳃、心脏、肝胰腺、性腺四种器官酯酶同工酶的变化。结果表明:汞对鳃、心脏和肝胰腺酯酶同工酶活性的影响既有激活作用又有抑制作用,而对性腺酯酶同工酶的影响则主要是抑制作用。同时讨论了长江华溪蟹酯酶同工酶酶带的变化可作为环境检测的生物指标。 4.汞对长江华溪蟹卵巢总DNA的影响汞对长江华溪蟹(sinopot胭on yangtsekiense)细胞及分子水平的影响 以体外暴露的方法,对经汞体外暴露一周长江华溪蟹的卵巢总DNA,采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术对13条随机引物的扩增图谱用Nei共享度公式进行分析。结果表明:正常组和处理织的扩增图谱之间存在着差异,各个浓度组之间的扩增图谱也存在着差异。这些差异既有谱带数目的变化,又有谱带深浅的变化。一定浓度范围内的汞处理雌蟹,谱带差异与其它浓度处理组同正常织相比较大。