目的:脑出血(intracerebral hemorrhage, ICH)是指脑动脉、静脉或毛细血管破裂导致脑实质内的出血。脑出血占急性脑血管病的20%～30%,致残率及死亡率较高,严重危害人民身体健康,国内外对此病均高度重视。脑出血后,通常在6h开始出现出血灶周边脑组织水肿,72小时左右达高峰,半个月后逐渐消退。脑水肿加重脑组织损伤,控制脑水肿和颅内高压是降低病死率和病残率的关键。如果能清楚地知道脑出血后6小时与72小时病灶周边脑组织差异表达蛋白,则对从分子角度理解脑出血及出血后水肿的病理机制和研发新的临床治疗药物有重要意义。新近出现的蛋白质组学技术是生命科学进入后基因组时代的标志之一。蛋白质组学(Proteomics)是指根据蛋白质种类、数量以及时间、空间上的变化来研究表达于细胞、组织及个体中的全部蛋白质(proteome),并从其结构和功能的角度综合分析生命活动的一门科学。蛋白质组学可以比较两种或更多的样品之间的蛋白质水平,是揭示疾病分子机制,发现疾病标志蛋白,寻找新的药物靶标的理想工具。本研究利用蛋白质组学技术对脑出血动物模型血肿周围的脑组织进行动态研究,比较出血后6小时与72小时的脑组织差异表达蛋白,旨在深入理解脑出血及出血后水肿的分子机制,并为寻找更为有效的治疗方法提供实验依据。方法:利用立体定向仪制作大鼠尾状核脑出血动物模型,在6小时、72小时的时间点取病灶周围的脑组织为样本,提取脑组织蛋白,进行双向凝胶电泳:以固相PH梯度等电聚焦为第一向,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)为第二向进行双向电泳(2-DE),凝胶固定后以考马斯亮兰R250染色,图像分析软件ImageMaster 2D Elite分析电泳图谱,得到差异表达蛋白质点;然后对差异表达蛋白进行胶内酶解,所得肽段用基质辅助激光解析/电离-飞行时间(MALDI-TOF)质谱仪检测,得到的肽片段质量指纹图谱检索蛋白质数据库,鉴定出差异表达蛋白。结果:41种蛋白质的表达量在脑出血后72小时组与6小时组有显著不同,其中19种蛋白质在脑出血后72小时组的脑组织中表达量上调,经鉴定这些蛋白质为丙酮酸脱氢酶-2,空泡型质子泵-B2,神经胶质原纤维酸性蛋白质,肌动蛋白相关蛋白-3,胞质氨肽酶,磷酸甘油酸激酶-1(PGK-1),延长因子Tu,细胞分裂相关蛋白1,嘌呤核苷酸化酶(PNPase),抑制素,膜联蛋白A5, 14-3-3蛋白-ε,F肌动蛋白加帽蛋白α-2,β-突触核蛋白,L-异天冬氨酸蛋白质邻甲基转移酶(PIMT),腺苷酸激酶同工酶-1,丙酮酸激酶同工酶M1/M2,胞外信号调节激酶-2,T-复合物蛋白1-ε; 21种蛋白在脑出血后72小时组的表达量下调,经鉴定为移行性内质网ATP酶,内质网素,肌动蛋白聚合蛋白,二氯硫辛酸脱氢酶,吡哆醛激酶,电压依从性阴离子选择性通道蛋白1,碳酸酐酶2,磷酸甘油酸酯变位酶,谷胱甘肽S-转移酶Yb-3,神经元蛋白22,腺苷高半胱氨酸酶,促分裂原活化蛋白激酶激酶1(MAPKK1),二氢嘧啶酶相关蛋白5(DRP-5),空泡型质子泵-E1(V-ATPase subunit E 1),二氢喋啶还原酶,肽基-脯氨酰顺-反异构酶,肌酸激酶B,α中央丝连接蛋白,膜收缩蛋白α链,果糖-二磷酸醛缩酶C,GTP结合蛋白G-α,发动蛋白-1。结论:我们鉴定出一些可能参与脑出血后应激反应、炎症反应、凋亡、神经修复等病理生理过程的蛋白。这有利于我们在蛋白质水平上对脑出血后疾病的病理损伤机制进行全面而整体的认识。